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來源: 發(fā)布時間:2022-03-07

特點與優(yōu)點: 高產(chǎn):沒有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設(shè)計使換液過程更溫和 快速:從細(xì)胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。靜安區(qū)默克15ml超濾濃縮管聯(lián)系電話

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蛋白親和純化(無需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心,總耗時~75分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。(柱床)樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動促進結(jié)合。楊浦區(qū)濃縮管報價超濾濃縮管哪家比較靠譜?

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外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進行細(xì)胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *

膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關(guān)注的是采用的超濾膜及設(shè)備對目標(biāo)蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質(zhì)對生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產(chǎn)品成為優(yōu)先的**技術(shù)關(guān)鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質(zhì)的 吸附對樣品收率會產(chǎn)生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應(yīng)該考慮采用較小的設(shè)備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應(yīng)該選 用膜面積小的裝置,同時保證一定的流速。默克密理博設(shè)計了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統(tǒng),支持您獲得理想的處理效果。超濾濃縮管的好處您了解多少呢?

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將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準(zhǔn)備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做:將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時濃縮。 8. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標(biāo)記好的抗體。 特點與優(yōu)點: 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 上海超濾濃縮管哪家比較好?徐匯區(qū)默克離心濃縮管哪家好

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加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結(jié)合反應(yīng)時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。靜安區(qū)默克15ml超濾濃縮管聯(lián)系電話

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