創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA
我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景:適合生物實驗室、醫學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。
將200,000個功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時后,移除DNA靶標溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標DNA具有特異性,孵育1小時。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 數字化高敏ELISA芯片,可以進行8孔、4孔的靈活檢測。單分子級別數字ELISA靈活
創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA
我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景:適合生物實驗室、醫學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。
在前列腺切除術后患者中,能夠準確量化PSA水平的能力,即使在非常低的濃度(<300fM或10pg/mL)下,也應提供如果PSA水平升高,早期提示復發17,29。圖4顯示PSA水平使用數字ELISA在30名接受治理性前列腺切除術且術后至少6周采集血液的患者血清中進行測量。所有30例患者的血清PSA水平均低于商業檢測限采用PSA數字ELISA(圖3A)對全血清樣本進行稀釋1:4后測定,成功檢測到所有30例患者中PSA,濃度范圍為14fg/mL至9.4pg/mL,平均濃度為1.5pg/mL。需要進一步的臨床研究來確定在RP患者中測量PSAfg/mL水平的診斷益處。 微型數字ELISA開放6)數字化高敏ELISA芯片試劑盒,10ul樣本可同時測2-4個指標;
芯棄疾JX-8B數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品;應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。
生物實驗室、醫學實驗室常見問題:ELISA使用繁瑣、用時長、樣本用量大、使用不夠靈活。使用方法比較繁多,用時長,每次檢測可能要花幾個小時,經常半天就測試了一輪工藝;如果要根據結果來改善,就得再花上半天、一天;使用和實驗安排不夠靈活。ELISA試劑盒每次購買和使用,大多都要以整版方式進行,不夠靈活。
創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA
我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景:適合生物實驗室、醫學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。
通過在離散的飛升微孔陣列中分離和檢測單個免疫復合物,實現數字ELISA已使在亞細胞水平上測量血清中臨床重要的蛋白質成為可能飛摩爾濃度。我們認為,與之前報道的方法相比,數字ELISA表現出的不敏感性改善將轉化為診斷上的好處。例如,在本研究中測定的30個RP樣品中有9個樣品的PSA水平低于基于納米顆粒標簽的先前比較高靈敏度PSA測定的LOD17。 芯棄疾單分子芯片依托單分散陣列化技術,實現飛克級高靈敏檢測,可捕獲數十萬反應磁珠。
芯棄疾JX-8B數字ELISA產品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
數字ELISA測量蛋白質濃度遠低于傳統ELISA的能力源于兩種效應:1)SiMoA對酶標記的高度敏感性;以及2)通過數字化蛋白質檢測可以實現的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術到標簽,抗體親和力,試驗背景,以及背景測量值的變異(%CV)27.SiMoA對酶非常敏感標簽(圖2)為在數字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標記蛋白提供了基礎。也就是說,對于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定,SiMoA的高標記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明,數字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結合(NSB)與捕獲珠表面結合(補充表2)。AsSiMoA相比傳統檢測方法具有更高的標記靈敏度,明顯減少了檢測抗體(~1nM)和酶標記物(1–50pM)的需要,以檢測結合事件,與傳統方法相比(標記試劑濃度~10nM)。降低的標記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導致背景信號明顯降低。 抗體篩選芯片高效篩選抗體配對,5μl 樣本即可測試多種組合,縮短研發周期。高科技數字ELISA檢測用時
單分子陣列化技術通過微米級結構與二次流原理,穩定捕獲磁珠,構建 “芯片實驗室” 模式。單分子級別數字ELISA靈活
芯棄疾JX-8B數字ELISA產品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
動力學上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質將在不到1min的時間內擴散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質分子的捕獲不會受到限制動力學上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應于泊松噪聲的可接受變異系數(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導致:a)非特異性結合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導致活性微球的比例過低,從而導致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。 單分子級別數字ELISA靈活