用于體外細胞培養的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內充分滋潤容器內壁;將胎牛血液置入上述滋潤過的取血容器內,搖動使其與胎牛血液均勻混合;將混合均勻的含有胎牛血液的混合液B置入采的血試管,保持血液在40℃以下恒溫狀態,然后將采的血試管在離心機中以3000-14000r/min轉速旋轉5-30分鐘,分離出血漿、血小板、血球,將所得血漿、血小板、血球分別采用采的血試管分離存放;胎牛血清是細胞培養中常用的天然培養基。深圳細胞培養用胎牛血清多少錢
挑選胎牛血清:Antibiotic含量,Antibiotic的使用情況,也需考慮在內。國內外的血清,都不對Antibiotic進行測試(無四環素胎牛血清之外)。但相較于國內Antibiotic的濫用,在其他國家,Antibiotic使用大多較為嚴格,用量有限,同時每頭牛的產品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含Antibiotic或者含量極低。內的毒性含量,在挑選血清時,還應關注內的毒性含量的高低。內的毒性含量高,容易引起細胞衰老、凋亡等情況,好的血清,內的毒性應該是極低的。因此,內的毒性可作為血清等級評判標準之一,其含量的高低,在一定程度上,體現了血清品質的優劣。鎮江細胞培養用胎牛血清供應商熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質,但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。
胎牛血清中沉淀物該如何處理?胎牛血清中沉淀物的出現有許多種原因,但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。所有胎牛血清均在當地獸醫部門的監督下從注冊的出口屠場采集,符合國際動物協會要求。胎牛血清參與細胞培養,是細胞生長天然的培養基,它為細胞提供生長因子、結合蛋白、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養。
胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中,如發現母牛懷孕,就應立即將生殖系統從尸體中分離出來,在無菌條件下從子宮中取出小牛,進行臍帶打結處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過導管被抽入無菌的血液收集袋內。在沒有真空泵時,也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過重力作用或按摩方式進行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經過離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個月,否則會因心臟太小而不便于操作。一個3月齡的胎兒可產生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產生350mL和550mL血清。因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。
胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,活性炭可以與親脂性分子結合,因此已用于從FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮質醇、睪酮、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些血清脂質Hormone傾向于干擾免疫測定系統和胰島素測定方法。2.透析,透析可以從FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。這包括極性和非極性分子。去除細胞因子、葡萄糖、氨基酸和許多其他物質。透析還可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。胎牛血清參與細胞培養,是細胞生長天然的培養基。蘇州特級血清價格
胎牛血清能結合或調變它們所結合的物質活力。深圳細胞培養用胎牛血清多少錢
胎牛血清:胎牛血清參與細胞培養,是細胞生長天然的培養基,它為細胞提供生長因子、結合蛋白、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養。透析胎牛血清主要用于可能需要關注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個領域:蛋白質組學、同位素標記、細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選,其中有些領域是相互交叉的。以下稍作舉例。將13C或15N標記的氨基酸摻入到培養基中培養細胞,來標記細胞內新合成的蛋白質,一般培養5-6代,細胞中的蛋白質將都被同位素標記。然后質譜分析,即可比較經過不同處理的細胞,其內部蛋白質豐度的變化。深圳細胞培養用胎牛血清多少錢
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