胎牛血清的作用:胎牛血清提供對維持細胞指數生長的Hormone,胎牛血清基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。胎牛血清提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,胎牛血清能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。胎牛血清是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。胎牛血清為細胞提供生長因子、結合蛋白、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養。嘉興標準胎牛血清哪里有
胎牛血清制備:離心,將準備好的瓶放入離心套筒調好平衡后,對稱放入離心機,按1800轉/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機抽氣口上。打開壓縮機,用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶內的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫冷藏備用。泰州特級血清哪里有賣透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的。
用于體外細胞培養的胎牛血清及其制備方法:包括以下步驟:采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿,具體步驟如下:采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進行混合,將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內充分滋潤容器內壁;將胎牛血液置入上述滋潤過的取血容器內,搖動使其與胎牛血液均勻混合;將混合均勻的含有胎牛血液的混合液B置入采的血試管,保持血液在40℃以下恒溫狀態,然后將采的血試管在離心機中以3000-14000r/min轉速旋轉5-30分鐘,分離出血漿、血小板、血球,將所得血漿、血小板、血球分別采用采的血試管分離存放;
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內的瓶中。采的血瓶采的血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。胎牛血清含有一些小分子物質,如氨基酸、糖類、脂類及Hormone類物質。
胎牛血清要求:1、性狀、外觀:淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質含量:3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量:≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗:陰性。5、支原體檢驗:陰性。6、細菌內的毒性:≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒:陰性。8、大腸桿菌噬菌體:陰性。9、支持細胞增殖:(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間:≤15h,克隆率:≥85%。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等。如果一次性無法用完一瓶血清,建議將胎牛血清無菌條件下分裝并儲存于-20℃。嘉興標準胎牛血清哪里有
有些情況下胎牛血清結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。嘉興標準胎牛血清哪里有
胎牛血清:胎牛血清參與細胞培養,是細胞生長天然的培養基,它為細胞提供生長因子、結合蛋白、脂質、礦物質、黏附和鋪展因子等來促進體外細胞培養。透析胎牛血清主要用于可能需要關注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個領域:蛋白質組學、同位素標記、細胞通訊以及報告基因細胞系的篩選,其中有些領域是相互交叉的。以下稍作舉例。將13C或15N標記的氨基酸摻入到培養基中培養細胞,來標記細胞內新合成的蛋白質,一般培養5-6代,細胞中的蛋白質將都被同位素標記。然后質譜分析,即可比較經過不同處理的細胞,其內部蛋白質豐度的變化。嘉興標準胎牛血清哪里有
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