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陜西中鹽核酸酶70950

來源: 發布時間:2024-03-19

核酸酶活性受到很多因素影響,如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此,不同客戶、不同項目中核酸酶的使用條件都不一。目前,生物制藥行業對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉,如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對于大部分使用Benzonase的項目,使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代,而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調整,同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細胞DNA(HCD)的去除效果更好、病毒載體得率更高。經過工藝優化后,可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2,且HCD去除效果及產品得率更高。致力于從深海microbe中識別新的冷適應酶,用于分子研究、IVD和biopharma領域。陜西中鹽核酸酶70950

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慢病毒載體既可以轉導分裂細胞也可以轉導非分裂細胞,被認為是安全的,并且可以提供長期的轉基因表達,是目前較通用的基因轉移方法之一。因慢病毒載體能有效地轉導靶細胞,如造血干細胞和T細胞,在細胞和基因藥物中的應用越來越guang泛。源自人類胚胎腎細胞的HEK293細胞系是成熟的生產LV的系統,因為它們非常適合懸浮培養并且易于轉染。在無血清培養基中的懸浮培養在大規模生產中具有優勢,因為它消除了批次之間的差異并降低了不定因子污染的風險。河南M-SAN中鹽核酸酶70950-160ArcticZymes致力于提供高質量產品,中鹽核酸酶具有好的批間一致性、穩定可靠的質量。

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在傳統生物技術行業(如抗體、疫苗領域)使用的下游純化工藝步驟,已經用于慢病毒的大規模下游處理。主要是基于膜(過濾/澄清,利用切向流過濾TFF進行濃縮/滲濾,基于膜的色譜)和色譜(離子交換色譜IEC,親和色譜AC,體積排阻色譜SEC)的技術。這些不同的過程步驟的組合是可變的,在某些情況下,不同的純化方法可以用于相同的目的。此外,采用benzonase/M-SAN HQ中鹽核酸酶降解污染的DNA或者用于下游的一個步驟,或者用于病毒生產階段。

病毒載體作為細胞藥物生產的關鍵原材料,直接關系到細胞產品質量。載體質量的控制和工藝穩定性和批間一致性都是關系到產品能否產業化的關鍵。在生產純化過程中,需要去除上游過程中的培養基成分、誘導劑、宿主蛋白和核酸等雜質,但是由于逆轉錄病毒顆粒比較大,高異質表面糖蛋白,而且活性易于受剪切影響,對下游純化提出了巨大的挑戰。目前病毒載體純化方法包括超速離心、離子交換層析、分子排阻層析、親和層析、滲濾等。各種方法各有利弊,就產業化而言,離子交換純化效果比較好,條件易于摸索,易于規模放大。相比全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD酶切成更小片段,破壞核小體結構。

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對于含包膜的病毒載體,如慢病毒LV、逆轉錄病毒RV等,在細胞培養上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽核酸酶,作為市場上更適合生理鹽條件的核酸酶,所以,M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產的更好選擇。優勢在于:1. M-SAN HQ兼容多種細胞培養體系,在細胞培養鹽濃度條件下具有更優活性;2. M-SAN HQ酶活更高、酶切速度更快,縮短孵育時間;3. M-SAN HQ能夠高效剪切染色質到更小片段,簡化下游工藝流程;4. 相比Benzonase,M-SAN HQ用量減少1/2-2/3,降低了酶用量及生產成本。在細胞培養液或收獲的培養上清中,不需調整任何組分,M-SAN HQ中鹽核酸酶即可表現較高核酸酶活性。河南M-SAN中鹽核酸酶70950-160

生理鹽濃度下,M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優于常用核酸酶,對HCD的去除有些本質區別。陜西中鹽核酸酶70950

在生物工藝中,核酸酶的主要作用是高效消化宿主細胞DNA(HCD),并將其分解成足夠小的片段,以便在下游純化過程中去除。雖然大多數核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段,比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈,但實際生產中的核酸污染情況更加復雜。HCD通常以染色質形式存在,與細胞裂解碎片、病毒顆粒等結合在一起,影響核酸酶的識別及剪切。因此,HCD去除的關鍵在于——核酸酶如何在復雜的生產體系中識別并剪切HCD。陜西中鹽核酸酶70950

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