本研究中使用的hPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質(zhì)干細(xì)胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細(xì)胞,每次傳代結(jié)束時,收獲細(xì)胞,并使用臺盼藍(lán)和一個自動細(xì)胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代。更多關(guān)于Sexton的相關(guān)產(chǎn)品歡迎咨詢上海曼博生物!GMP級人血小板裂解液, 富含各類生長因子, 是很好的胎牛血清替代物。進口血小板裂解液的主要成分
細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因為這會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢官方代理商上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio科研等級血小板裂解液沉淀血小板裂解液的制血方法是什么?
經(jīng)常有客戶會問道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養(yǎng)之前有必要花時間來優(yōu)化下這個肝素濃度參數(shù)嗎?現(xiàn)在小編通過比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養(yǎng)基中培養(yǎng)MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
使用胎牛血清(FBS)和MSC的離體擴增其他動物衍生的已氣餒由監(jiān)管機構(gòu),以減少發(fā)送朊病毒和其他動物傳染病的危險,并且避免在所述異種免疫反應(yīng)主辦。然而,由于缺乏FBS制劑標(biāo)準(zhǔn)化導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)性能 不一致性和FBS生產(chǎn)已經(jīng)到來,因為動物福利問題很初提出血小板裂解液(PL)作為動物血清的替代物,用于由Doucet等人體外擴增MSC。 包含在PL的生物活性分子和生長因子支持的MSC從骨髓(BM) 導(dǎo)出的膨脹,臍帶血(UCB) ,和脂肪組織(AT) ,與FBS相比顯示出有利的結(jié)果。此外,間充質(zhì)干擴大了與PL-富集介質(zhì)已被用于zhiliao患有jisu難治性急性移植物抗宿主病(GVHD)造血干細(xì)胞移植后患者和患有幾種骨科疾病的患者,主要是中度至重度的膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎 。血小板裂解液和胎牛血清,各自有利弊,只是這些年大家對血小板裂解物的熱情比較高漲。
間充質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞(MSCs)體外擴增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風(fēng)險,監(jiān)管機構(gòu)并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風(fēng)險,有助于增強間充質(zhì)干細(xì)胞的擴增,也相對容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。 血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細(xì)胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。 更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!哪家公司代理的血清替代品質(zhì)好?達(dá)優(yōu)血小板裂解液授權(quán)代理商
血小板裂解液的血源從哪里采集?進口血小板裂解液的主要成分
ELAREM Prime血小板裂解液是一款基于人血小板的高性價比的細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,為細(xì)胞提供了無動物源血清的培養(yǎng)環(huán)境,但是維持相同的細(xì)胞生長效果。ELAREM Prime血小板裂解液來源于輸血級的血小板,具有穩(wěn)定的貨源供應(yīng),而無需像FBS一樣依賴于屠宰行業(yè),確保了平穩(wěn)的價格和安全的細(xì)胞培養(yǎng)條件。ELAREM Prime生產(chǎn)于無菌條件下大量混合的血小板單位,批次和批次間的穩(wěn)定性保證了可重復(fù)的實驗數(shù)據(jù),無需像FBS一樣進行批次間實驗檢測。ELAREM Prime支持學(xué)術(shù)研究,工業(yè)生產(chǎn)以及體外診斷行業(yè)中的細(xì)胞體外擴增應(yīng)用。其中的生長因子組分增強不同細(xì)胞類型和細(xì)胞系的繁殖和維持。進口血小板裂解液的主要成分