目前,CAR-T細胞主要通過病毒載體制備,大多數情況下由慢病毒或逆轉錄病毒做載體。慢病毒載體(LVs)由于其有效的將基因整合進靶細胞基因組,穩定的基因表達等特點,被認為是Zui有希望的基因zhi liao載體。與其他病毒載體相比,慢病毒載體的整合模式具有更低的致Ai風險,以及隨機整合基因風險低,因此,用慢病毒載體生產CAR-T細胞更加安全有效,而且靈活。更重要的是慢病毒相較于其他病毒載體,生產成本相對較低。另外,慢病毒載體可以轉導分化細胞,也可以轉導分化細胞,因此,慢病毒載體可以轉導更為guang fan的細胞,包括那些難轉導的血液前體細胞,神經細胞,淋巴細胞和巨噬細胞。什么是慢病毒轉導增強劑?全自動慢病毒轉導方案
人間充質干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉導可誘導長期轉基因表達,并為多種基因zhi liao應用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉導效率的試劑,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優化轉導方案以應用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉導增強劑,可以按照現行的GMP標準生產,且很容易應用于現有的轉導方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉導研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉錄病毒的轉導效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉導。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉導增強劑,歡迎咨詢官方代理商上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bioHSC細胞慢病毒轉導工藝用什么試劑可以做慢病毒轉染呢?
影響轉導效率的另一個關鍵參數是gan ran復數(MOI),MOI指的是每個細胞gan ran的病毒粒子個數,病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細胞類型的不同而不同,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI。MOI值越大,慢病毒gan ran上的可能性也越大,gan ran效率越高,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,也說明細胞越難被轉導。慢病毒gan ran時間也相當重要,gan ran后換液太早會導致gan ran效率下降;gan ran后換液太晚,則對細胞的損傷太大,效率也不高。一般在gan ran后24h換液,如果慢病毒對細胞產生了明顯的毒性,可根據細胞生長狀態及時提前換液。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
德國 Sirion Biotech 公司研發了 LentiBOOST 慢病毒轉導增強劑,專為提高病毒基因轉導難轉的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑,用于臨床前和臨床應用。作為一種普遍作用的(受體非依賴型)佐劑,可應用于多種臨床相關細胞類型,CD34+造血干細胞(HSCs)、原代 T 細胞和 NK 細胞等,對難轉導的小鼠 T 細胞亦有效。LentiBOOST 已成為改進體外 (ex vivo) 基因zhi liao和 CAR-T 細胞zhi liao的臨床轉導方案的選擇。近幾年LentiBOOST作為一種無毒性的化學轉導增強劑guang fan引起關注。LentiBOOST通過與細胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質交換和跨膜轉運,提高轉導效率。研究證實LentiBOOST在不影響轉導細胞存活、增殖及分化能力的前提下,提高小鼠T細胞、HSCs和人HSCs的慢病毒轉導效率。
為提供更好的服務,上海曼博生物醫藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區域LentiBOOST產品業務的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。 慢病毒包裝系統一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成的。
Lentiboost可增強慢病毒轉導效率,高達90%以上,研究證明對于細胞增殖無不良影響,且在T細胞中觀察到一定的促增殖效果。可減少MOI,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉導細胞的數量,但不會過度增加單個細胞病毒載體拷貝數(VCN),符合FDA/EMA對ATMP產品的安全標準。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質交換和跨膜轉運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉導效率。目前該產品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中,并有相關藥物已上市銷售。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導增強劑,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號查看更多LentiBOOST技術文章:Mine-bio慢病毒轉導可以使用哪些試劑?全自動慢病毒轉導方案
新合成的逆轉錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒.全自動慢病毒轉導方案
人間充質干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉導可誘導長期轉基因表達,并為多種基因zhi liao應用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉導效率的試劑,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優化轉導方案以應用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉導增強劑,可以按照現行的GMP標準生產,且很容易應用于現有的轉導方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉導研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉錄病毒的轉導效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉導。更多技術文章歡迎關注公眾號:Mine-bio全自動慢病毒轉導方案