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BstDNA聚合酶對dUTP的耐受性對實驗結(jié)果有以下影響:1.**防止交叉污染**:BstDNA聚合酶具有較高的dUTP耐受性,這意味著它可以在反應(yīng)體系中添加dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng)的情況下工作,有效防止LAMP產(chǎn)物的交叉污染,確保數(shù)據(jù)的準確性。2.**保持靈敏度和擴增效率**:即使在引入dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng),使用dUTP替換dTTP的情況下,BstDNA聚合酶的靈敏度及擴增效率不受影響。實驗數(shù)據(jù)顯示,在反應(yīng)體系中添加dUTP對BstDNA聚合酶的擴增靈敏度和效率沒有負面影響。3.**提高實驗的可靠性**:由于BstDNA聚合酶能夠在高濃度的dUTP存在下保持活性,這使得它在進行等溫擴增時更加可靠,尤其是在需要防止DNA污染的實驗中。4.**兼容dUTP/UDG系統(tǒng)**:BstDNA聚合酶對dUTP的耐受性好,高度兼容dUTP/UDG系統(tǒng),這對于避免交叉污染和提高實驗結(jié)果的準確性至關(guān)重要。綜上所述,BstDNA聚合酶的高dUTP耐受性為等溫擴增實驗提供了一個重要的優(yōu)勢,即在保持高靈敏度和擴增效率的同時,能夠有效防止交叉污染,從而提高實驗結(jié)果的可靠性和準確性。牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I應(yīng)儲存在-20°C的環(huán)境中,這有助于保持其活性。在這種條件下,該酶可以保存長達3年。Recombinant Human ENPP-3 (558-875) Protein,His Tag
蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一種特殊的融合蛋白,它結(jié)合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些關(guān)鍵特點和應(yīng)用:1.**融合表達產(chǎn)物**:pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達產(chǎn)物,因此它同時具有ProteinA的抗體結(jié)合活性和MNase的核酸內(nèi)切酶活性。2.**雙重功能**:由于其雙重功能,pA-MNase常用于蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究,特別是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技術(shù)中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的細胞壁表面蛋白,分子量為42kDa,能特異性地與哺乳動物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)結(jié)合,通常結(jié)合部位為免疫球蛋白的Fc區(qū)。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一種核酸內(nèi)切酶,能夠降解核酸,常用于降解蛋白質(zhì)制備中存在的核酸,減少細胞裂解液的粘度,以及用于染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析和快速RNA測序。5.**反應(yīng)條件**:MNase的反應(yīng)條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要補充100μg/ml重組白蛋白,分子生物學級,并在37°C下孵化。Recombinant Human CLDN1/Claudin-1 Protein-VLPTn5轉(zhuǎn)座酶高通量測序建庫、ATAC-seq 等多種先進的分子生物學技術(shù),能夠與這些技術(shù)很好地結(jié)合。
高靈敏度與特異性該產(chǎn)品采用優(yōu)化的SYBRGreenI染料配方,能夠與雙鏈DNA特異性結(jié)合,即使在低拷貝數(shù)的目標序列中也能實現(xiàn)高靈敏度檢測。其優(yōu)化的反應(yīng)體系確保了高效的擴增效率,同時減少了非特異性產(chǎn)物的生成。低ROX參考染料產(chǎn)品中預混了低濃度的ROX參考染料,適用于多種qPCR儀器平臺,無需額外添加或調(diào)整ROX濃度,簡化了實驗操作流程,同時保證了熒光信號的穩(wěn)定性和準確性。UDG防污染系統(tǒng)為了防止qPCR實驗中的氣溶膠污染,該產(chǎn)品引入了dUTP/UDG防污染體系。UDG酶能夠降解含有dUTP的殘留DNA,從而有效避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn),確保實驗數(shù)據(jù)的可靠性。快速反應(yīng)與模板兼容性SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX,UDGPlus)采用了高性能的熱啟動TaqDNA聚合酶,能夠在短時間內(nèi)完成反應(yīng),同時兼容高GC或高AT含量的DNA模板,展現(xiàn)出優(yōu)異的擴增性能。便捷的2×預混液設(shè)計該產(chǎn)品為2×濃度的預混液,包含qPCR所需的所有關(guān)鍵組分,如TaqDNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等,需加入引物和模板即可進行反應(yīng),簡化了實驗操作。
ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端處理上的主要不同點如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脫氧核糖核酸酶活性,它從DNA鏈的3'-OH末端逐步切去單核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一種5'→3'核酸外切酶,能選擇性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的雙鏈DNA。2.**底物特異性**:-**ExoIII**:適底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于雙鏈DNA切刻位點產(chǎn)生單鏈缺口。由于對單鏈DNA無活性,因此難以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:適底物是5'磷酸化的雙鏈DNA,對單鏈DNA和5'端未磷酸化修飾的DNA的酶切活性較低,不能從DNA的切刻或缺口處起始消化。3.**活性差異**:-**ExoIII**:對具有3'-突出末端(至少有4個堿基,且具有3'-末端C殘基)的DNA、單鏈DNA、硫代磷酸酯連接的核苷酸無活性。-**Lambda核酸外切酶**:對5'-OH端的切割速度比5'-P端慢約20倍;對單鏈DNA的酶切速度比雙鏈DNA慢約100倍。4.**應(yīng)用場景**:-**ExoIII**:可以用于生產(chǎn)特定方向的單鏈DNA,將線性化DNA設(shè)計成為一端為不切割末端(3'突出端),另一端則設(shè)計為易切割末端(平端或5'突出端)。
Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye):擴增的得力助手在現(xiàn)代分子生物學研究中,聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)是不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因克隆、基因表達分析、遺傳病診斷、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。而一款PCR反應(yīng)體系則是實驗成功的關(guān)鍵。Hot-Start Taq Master Mix (2×)(Without Dye)憑借其獨特的配方和性能,成為了眾多科研工作者的主要。一、熱啟動機制:開啟擴增之門Hot-Start技術(shù)是該Master Mix的亮點之一。在常規(guī)PCR反應(yīng)中,由于Taq酶在室溫下就具有活性,容易導致引物非特異性結(jié)合和延伸,從而產(chǎn)生非特異性擴增產(chǎn)物,影響實驗結(jié)果的準確性和重復性。而Hot-Start Taq Master Mix通過特殊的化學修飾或抗體封閉技術(shù),在反應(yīng)初期將Taq酶的活性暫時抑制,只有當反應(yīng)體系升溫至一定溫度時,修飾或抗體才會被破壞,Taq酶活性得以釋放。這一機制有效避免了低溫下的非特異性擴增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和準確性,尤其適用于復雜模板、低豐度靶基因以及對特異性要求極高的實驗場景。盡管Ultra-Long Master Mix設(shè)計用于長片段擴增,但在某些情況下,可能出現(xiàn)非特異性擴增,需要通過優(yōu)化引物。熱敏磷酸酶
Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種專為高保真PCR擴增設(shè)計的預混液,廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域。Recombinant Human ENPP-3 (558-875) Protein,His Tag
BsuDNAPolymerase(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶)在PCR中的應(yīng)用具有多個優(yōu)勢,以下是一些關(guān)鍵點:1.**鏈置換活性**:BsuDNAPolymerase具有很強的鏈置換活性,這使得它非常適合于等溫擴增技術(shù),如重組酶聚合酶擴增(RPA)。在這些技術(shù)中,BsuDNAPolymerase可以快速、高效、特異性地擴增模板,在10到30分鐘內(nèi)將痕量的核酸模板(低至單拷貝)擴增至可以檢出的水平。2.**高溫穩(wěn)定性**:BsuDNAPolymerase在高溫下保持活性,這使得它在一些需要高溫反應(yīng)的實驗條件下表現(xiàn)出色。3.**高靈敏度和特異性**:BsuDNAPolymerase在等溫擴增中展現(xiàn)出高靈敏度,能夠?qū)⑽⒘亢怂崮0鍞U增到可檢測水平。同時,它也具有高特異性,減少了非特異性擴增的風險。4.**簡化的樣品處理**:BsuDNAPolymerase可以直接對復雜樣品進行擴增,無需事先進行復雜的核酸純化和提取步驟,節(jié)省了時間和成本。5.**可擴增DNA和RNA**:BsuDNAPolymerase不僅可以擴增DNA,還可以直接擴增RNA,省去了額外的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)(cDNA合成)步驟,這對于RNA的檢測和分析更加方便快捷。6.**無核酸外切酶和RNase殘留**:BsuDNAPolymerase在生產(chǎn)過程中確保無核酸外切酶、切口酶及RNase殘留,這有助于提高實驗的準確性和重復性。Recombinant Human ENPP-3 (558-875) Protein,His Tag