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Recombinant Human MXRA8 Protein

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-08

5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶通常被稱為腺苷酰化酶(Adenylase),這種酶能夠催化5'端磷酸化的單鏈DNA或RNA(pDNA或pRNA)轉(zhuǎn)換成5'端腺苷酰化DNA或RNA(AppDNA或AppRNA)。根據(jù)搜索結(jié)果,該酶的來源是嗜熱古細(xì)菌,在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)并純化而獲得。這種酶在反應(yīng)中將ATP分解成AMP和PPi,然后將AMP轉(zhuǎn)移到單鏈DNA的5'磷酸基團(tuán)上,形成腺苷酰化單鏈DNA,從而制備出腺苷酰化接頭(linker)。此外,一些5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶是MthRNA連接酶(例如NEB#M2611A),這種酶也用于生成高產(chǎn)量的5'腺苷酰化DNA,并且操作簡(jiǎn)便,具有超過95%的效率,無(wú)需凝膠純化即可完成單步反應(yīng)。MthRNA連接酶是一種已知能夠在65℃下有效工作的酶,有助于避免DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)腺苷酰化反應(yīng)的干擾。這些酶的高效率和特異性使得5'DNA腺苷酰化試劑盒在單鏈DNA的5'端腺苷酰化修飾中非常有效,常用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測(cè)序建庫(kù)或PCR檢測(cè)等應(yīng)用中。可以利用現(xiàn)有的計(jì)算工具,如CRISPR design tools,預(yù)測(cè)gRNA的活性和特異性,以輔助實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 。Recombinant Human MXRA8 Protein,His Tag

Recombinant Human MXRA8 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

dNTPMix(脫氧核苷酸三磷酸混合溶液)的穩(wěn)定性是進(jìn)行PCR和其他DNA合成實(shí)驗(yàn)時(shí)的重要因素。以下是一些關(guān)于dNTPMix穩(wěn)定性的關(guān)鍵點(diǎn):1.**儲(chǔ)存條件**:dNTPMix應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C的條件下,以保持其穩(wěn)定性和活性。2.**避免反復(fù)凍融**:dNTPMix應(yīng)避免多次凍融,因?yàn)檫@可能會(huì)影響其穩(wěn)定性。3.**使用頻率**:如果使用頻率較高,使用后應(yīng)以-20°C儲(chǔ)存。4.**長(zhǎng)期儲(chǔ)存**:對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存或使用頻率較低的情況,建議將dNTPMix儲(chǔ)存在-70°C以保持好的狀態(tài)。5.**質(zhì)量控制**:dNTPMix應(yīng)不含DNase和RNase,以避免DNA或RNA的降解。6.**純度**:dNTPMix的純度通常≥99%(HPLC檢測(cè)),確保了其在實(shí)驗(yàn)中的可靠性。7.**pH調(diào)節(jié)**:dNTPMix通常用超純水配制,并通過高純度NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至約7.0,以保持其穩(wěn)定性。8.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下,dNTPMix的有效期通常為2年或更長(zhǎng)時(shí)間。9.**使用注意事項(xiàng)**:使用dNTPMix時(shí),應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)室防護(hù)裝備,如實(shí)驗(yàn)服和一次性手套,以確保操作安全。SAMS PeptideTBE (Thymine base editor):這是一種新型的堿基編輯工具,不依賴脫氨酶,能夠通過人源化尿嘧啶DNA-糖基化酶。

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pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的產(chǎn)品組分通常包括以下幾個(gè)部分:1.**pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶蛋白**:一種高活性的Tn5轉(zhuǎn)座酶突變體與ProteinA的融合蛋白,它是產(chǎn)品的主要組分,用于實(shí)現(xiàn)DNA片段化和接頭連接的功能。2.**儲(chǔ)存溶液**:碧云天的BeyoNGS?pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶產(chǎn)品含有特定的儲(chǔ)存溶液,其組成為50mMHEPES(pH7.2),100mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%TritonX-100,50%(v/v)Glycerol,這種溶液有助于保持酶的穩(wěn)定性和活性。3.**測(cè)序接頭(Adapters)**:用于與pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶組裝形成pA-Tn5轉(zhuǎn)座體(pA-Tn5Transposome),這是進(jìn)行CUT&Tag實(shí)驗(yàn)的必需組分。4.**反應(yīng)緩沖液**:部分產(chǎn)品包含用于轉(zhuǎn)座酶反應(yīng)的緩沖液,例如5×TagmentBuffer,這種緩沖液含有Mg2+,對(duì)轉(zhuǎn)座酶的活性至關(guān)重要。5.**附件**:某些產(chǎn)品可能還包括附件,如說明書,提供產(chǎn)品使用和保存的詳細(xì)信息。6.**其他組分**:根據(jù)產(chǎn)品的不同,可能還包括CouplingBuffer、AnnealingBuffer等其他輔助組分,這些組分有助于轉(zhuǎn)座酶與DNA的結(jié)合和反應(yīng)的進(jìn)行。7.**包裝規(guī)格**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的包裝規(guī)格可能有所不同,例如碧云天提供的BeyoNGS?pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶有800pmol和4000pmol兩種包裝規(guī)格。

BloodDirectPCRMasterMix(2×)是一種專為從全血樣本直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增而設(shè)計(jì)的即用型2倍濃度的預(yù)混合溶液。這種產(chǎn)品允許研究人員在不需要預(yù)先進(jìn)行DNA提取或樣品處理的情況下,直接使用抗凝血樣品或干血斑樣品進(jìn)行基因組DNA中目的基因的擴(kuò)增。它通常包含以下特點(diǎn):1.**耐血液樣本中的抑制劑**:含有的DNA聚合酶能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉等。2.**高效率**:特別改造的DNA聚合酶具有高效率,能夠快速擴(kuò)增目標(biāo)DNA。3.**簡(jiǎn)便性**:簡(jiǎn)化了PCR實(shí)驗(yàn)的步驟,因?yàn)椴恍枰M(jìn)行DNA的提取和純化。4.**直接電泳**:PCR產(chǎn)物可直接上樣進(jìn)行電泳分析,無(wú)需添加額外的上樣緩沖液。5.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,并且可以與多種常見PCR儀器配合使用。6.**優(yōu)化的配方**:包含優(yōu)化的緩沖體系、dNTPs、Mg2+等,適合血液樣本的PCR擴(kuò)增。例如,Easy-Load?BloodDirectPCRMasterMix(2X)就是這類產(chǎn)品中的一個(gè),它含有耐血的HemoTaq?DNA聚合酶,適用于EDTA、肝素或檸檬酸鈉抗凝血樣品或干血斑樣品直接PCR檢測(cè)。此外,

由于Pfu DNA Polymerase 對(duì)引物的質(zhì)量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯(cuò)誤導(dǎo)致的非目標(biāo)突變。

Recombinant Human MXRA8 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

DNaseI是一種使用的酶,它能夠水解單鏈或雙鏈DNA,產(chǎn)生5'端為磷酸基團(tuán)的二核苷酸、三核苷酸或更短的寡核苷酸片段。這種酶的活性依賴于鈣離子,并且可以被鎂離子或二價(jià)錳離子啟動(dòng)。在鎂離子存在的情況下,DNaseI可以隨機(jī)剪切雙鏈DNA的任意位點(diǎn);而在二價(jià)錳離子存在時(shí),它可以在同一位點(diǎn)剪切DNA雙鏈,形成平末端或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。DNaseI的一個(gè)特點(diǎn)是它不含RNase活性,因此可以用于處理各種RNA樣品,而不會(huì)對(duì)RNA造成降解。DNaseI的應(yīng)用非常廣,包括但不限于:-制備不含DNA的RNA樣品;-在RT-PCR反應(yīng)前去除RNA樣品中可能的DNA污染;-體外RNA聚合酶催化的RNA轉(zhuǎn)錄后去除DNA模板;-進(jìn)行DNaseI足跡實(shí)驗(yàn)研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用;-缺口平移(nicktranslation);-產(chǎn)生DNA隨機(jī)片段文庫(kù);-在細(xì)胞凋亡TUNEL檢測(cè)中部分剪切基因組DNA作為陽(yáng)性對(duì)照。DNaseI通常從牛胰腺中純化得到,其分子量約為32kDa(單體)。活性定義為在37℃、10分鐘內(nèi),能夠完全降解1μgpBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量。在實(shí)驗(yàn)中,DNaseI的活性單位通常以Kunitz單位來表示,該單位是基于特定條件下酶降解DNA的能力來定義的。利用牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的連接原理,可以在無(wú)需DNA連接酶的情況下,快速高效地連接DNA片段,實(shí)現(xiàn)克隆。Recombinant Human FOLR1(His-Avi Tag)

由于Cas9 NLS系統(tǒng)不涉及DNA的整合,因此降低了外源DNA整合至細(xì)胞基因組的風(fēng)險(xiǎn) 。Recombinant Human MXRA8 Protein,His Tag

Benzonase核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒的組分經(jīng)過優(yōu)化,以確保高靈敏度、高重復(fù)性和高準(zhǔn)確性的檢測(cè)結(jié)果。以下是該試劑盒優(yōu)化的組分:1.**2×BenzDetectionSolution**:這是檢測(cè)中的關(guān)鍵組分,用于提供反應(yīng)所需的緩沖環(huán)境,規(guī)格為1mL。2.**標(biāo)準(zhǔn)品**:試劑盒中包含多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,包括25ng/ml、12.5ng/ml、6.3ng/ml、3.1ng/ml和1.5ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品,各100μL。這些標(biāo)準(zhǔn)品用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而準(zhǔn)確計(jì)算出樣品中的Benzonase殘留量。3.**樣品稀釋液**:提供1.5mL的樣品稀釋液,用于適當(dāng)稀釋待檢測(cè)樣品,以適應(yīng)檢測(cè)范圍。4.**反應(yīng)緩沖液(10XReactionBuffer)**:用于調(diào)整反應(yīng)體系的pH值和離子強(qiáng)度,保證酶活的正常發(fā)揮。5.**Benzonase底物(5XBenzonaseSubstrate)**:這是含有熒光標(biāo)記的DNA探針,用于檢測(cè)Benzonase的活性。當(dāng)?shù)孜锉籅enzonase切割后,熒光信號(hào)增強(qiáng),從而可以檢測(cè)到Benzonase的存在。6.**無(wú)核酸酶水(Nuclease-freeWater)**:確保在稀釋和樣品準(zhǔn)備過程中不會(huì)引入額外的核酸酶污染。Recombinant Human MXRA8 Protein,His Tag

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