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進口investigator雙光子顯微鏡的原理

來源: 發布時間:2025-02-16

隨著技術的發展,雙光子顯微鏡的性能得到不斷地優化,結合它的特點,大致可以分成深和活兩個方面的提升。要想讓激發激光進入更深的層面,大致可從兩個方面入手,裝置優化與標本改造。關于裝置優化,我們可以把激光束變得更細,使能量更加集中,就能讓激光穿透更深。關于標本,其中影響光傳播的主要是物質吸收和散射,解決這個問題,我們需要對樣本進行透明化處理。一種方法是運用某種物質將標本浸泡,使其中的物質(主要是脂質)被破壞或溶解。另一種方法是運用電泳將脂質電解,讓標本的“透明度”提高。雙光子顯微鏡不需要共聚焦細孔,提高了熒光檢測效率。進口investigator雙光子顯微鏡的原理

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有了雙光子激發技術,激光共聚掃描顯微鏡可以發揮更好的作用。那么,什么是雙光子激發技術呢?在光子密度較高的情況下,熒光分子可以同時吸收兩個波長較長的光子,使電子躍遷到更高的能級。短時間后,電子跳回到較低的能級,發出波長為長波長一半的光子(P=h/λ)。利用這個原理,雙光子激發技術誕生了。雙光子顯微鏡使用長波長脈沖激光通過物鏡會聚。由于雙光子激發需要很高的光子密度,物鏡焦點處的光子密度比較高,所以雙光子激發只能發生在焦點處產生熒光,該點產生的熒光穿過物鏡,被光學探頭接收,從而達到逐點掃描的效果。雙光子顯微鏡能夠進行指標成像;

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生物樣品的三維觀察是了解細胞功能的重要方法之一。目前已有的三維熒光成像技術有光學顯微鏡、點陣照明和激光掃描顯微鏡(如共焦顯微鏡和雙光子顯微鏡)。其中,激光掃描顯微鏡利用轉盤可以進行多焦點激光掃描,提高了時間分辨率,有利于減少活細胞成像中的光損傷。本文主要實現可見光雙光子激發和多焦點激光掃描的結合,**終提高三維延遲掃描中的空間分辨率和成像對比度,這也是可見光雙光子激發(v2PE)在超高分辨率顯微鏡中的應用。雙光子顯微鏡使用長波長脈沖光,是通過物鏡匯聚的。進口激光熒光雙光子顯微鏡熒光探測

雙光子顯微鏡還可以對一些具有特性的染料細胞進行實驗,還有一些短波長可以利用雙光子特性進行特定實驗。進口investigator雙光子顯微鏡的原理

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