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來源: 發布時間:2025-01-26

雙光子顯微鏡是一種先進的成像技術,能夠實現細胞或組織的深層觀察。它的主要特點是使用雙光子激發來產生熒光,從而實現對生物樣品的高分辨率成像。雙光子顯微鏡的工作原理是利用激光的脈沖寬度極窄的特性,將高能激光束聚焦到生物樣品中,激發出熒光。這個過程需要使用一個特殊的雙光子激發源,它能夠將一個光子轉換為兩個光子,其中一個光子用于激發熒光,另一個光子則用于成像。雙光子顯微鏡具有以下優點:高分辨率:由于雙光子激發的特性,可以實現對生物樣品的高分辨率成像,特別是對于深層組織的觀察。穿透深度大:雙光子激光的波長較長,能夠更好地穿透生物組織,從而實現對深層細胞的觀察。熒光壽命長:雙光子激發產生的熒光壽命比單光子激發產生的熒光壽命長,這使得雙光子顯微鏡能夠更好地區分不同的熒光標記物。減少光毒性:由于雙光子激發的能量較低,因此對生物樣品的損傷較小,可以減少光毒性。總之,雙光子顯微鏡是一種非常有用的成像技術,可以用于生物學、醫學、材料科學等領域的研究。雙光子顯微鏡已延伸到各個領域研究中,它能對樣品進行三維觀察。進口ultima2PPLUS雙光子顯微鏡多少錢

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雙光子熒光顯微鏡是結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發技術的一種新技術。雙光子激發的基本原理是:在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子,在經過一個很短的所謂激發態壽命的時間后,發射出一個波長較短的光子;其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去激發熒光分子是相同的。雙(多)光子成像優勢在于,具有更深的組織穿透深度,利用紅外光,能夠在層面檢測極限達1mm的組織區域;因信號背景比高,而具有更高的對比度;因激發體積小,具有定點激發的特性,具有更少的光毒性;激發波長由紫外、可見光調整為紅外激發,使其能夠更加安全。國外熒光雙光子顯微鏡供應商聯系方式雙光子顯微鏡明日之星--FemtoFiber ultra 920 。

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通過對顯微光學系統的重新設計,將FHIRM-TPM2.0的成像視場擴展至420×420平方微米,顯微物鏡的工作距離擴展至1mm,實現無創成像。嵌入可拆卸的快速軸向掃描模塊,實現深度180微米的三維體成像和多平面快速切換的實時成像。該模塊由一個快速電動變焦鏡頭和一對中繼鏡頭組成,在不同深度成像時保持放大率恒定。其中,變焦模塊重1.8克,科研人員可以根據實驗要求自由拆卸。此外,新型微型成像探頭可以瞬間插拔,極大簡化了實驗操作,避免了長時間實驗對動物的干擾。反復裝卸探針追蹤同批神經元時,視場旋轉角度小于0.07弧度,邊界偏差小于35微米。

WinfriedDenk使用的第1個光源是染料飛秒激光(脈沖寬度100fs,可見光波長630nm)。染料激光雖然實驗室演示可以接受,但是使用起來不方便,所以離商業化還很遠。很快雙光子顯微鏡的標準光源變成了飛秒鈦寶石激光器。鈦寶石激光器除了具有固態光源的優點外,還具有近紅外波長調諧范圍寬,而近紅外比可見光穿透更深,對生物樣品的損傷更小。下圖是Thorlabs的雙光子和三光子顯微鏡配置,鈦寶石飛秒可調諧激光器位于平臺左側。從雙光子到三光子科學家們正在從雙光子顯微鏡轉向三光子顯微鏡。1996年,ChrisXu在康奈爾大學(Denk的導師實驗室)讀博時發明了三光子顯微鏡。如果雙光子吸收是可行的,那么三光子似乎是自然的發展方向。三光子成像使用更長的波長,大約1.3和1.7微米,成像深度比雙光子更深。目前錄音大約2.2毫米,人的大腦皮層厚度大約4毫米。與雙光子顯微鏡相比,三光子需要使用更強、更短、重復率更低的激光脈沖,這是傳統的鈦寶石激光器很難滿足的,但對于摻鐿光纖飛秒光參量放大器,比如我們的Y-Fi光參量放大器(OPA)就非常容易。雙光子顯微鏡的原理是什么?

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隨著技術的發展,雙光子顯微鏡的性能得到不斷地優化,結合它的特點,大致可以分成深和活兩方面的提升。要想讓激發激光進入更深的層面,大致可從兩個方面入手,裝置優化與標本改造。關于裝置優化,我們可以把激光束變得更細,使能量更加集中,就能讓激光穿透更深。關于標本,其中影響光傳播的主要是物質吸收和散射,解決這個問題,我們需要對樣本進行透明化處理。一種方法是運用某種物質將標本浸泡,使其中的物質(主要是脂質)被破壞或溶解。另一種方法是運用電泳將脂質電解,讓標本“透明度”提高。雙光子顯微鏡可以用于局部微蝕鐳射磨皮后的膠原重塑的檢測。國內bruker雙光子顯微鏡多少錢

雙光子顯微鏡在生物醫學研究中有廣泛的應用,可以觀察細胞內的亞細胞結構、蛋白質分布、細胞活動等。進口ultima2PPLUS雙光子顯微鏡多少錢

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