鈣成像技術通常使用熒光染料或報告基因來標記細胞中的鈣離子。當細胞受到外界刺激時,鈣離子會進入細胞內,導致熒光染料或報告基因發出光信號。通過觀察光信號的強度和分布,可以推斷出鈣離子的濃度和分布情況。鈣成像技術具有以下優點:高靈敏度:可以檢測到細胞內微小的鈣離子濃度變化。實時性:可以實時記錄鈣離子濃度的變化過程。空間分辨率高:可以清晰地觀察到鈣離子在細胞內的分布情況。無創性:可以通過huo體成像技術觀察動物體內的鈣離子變化情況。可重復性:可以對同一群體細胞進行多次成像,以評估不同處理或刺激的影響。總之,鈣成像技術是一種強大的生物醫學研究工具,可以幫助科學家們更好地了解細胞生理和病理狀態,為疾病診斷和zhi療提供有力支持。通過鈣成像技術發現神經元的活動與其內部的鈣離子濃度密切相關。重慶超微顯微鈣成像價位
麻省理工學院和波士頓大學的研究人員近研究使用一種熒光探針,能夠在大腦細胞處于電活動狀態時點亮,可以立即對小鼠大腦中多個神經元的活動進行成像。麻省理工學院的腦科學和認知科學神經技術教授、兼生物工程學教授EdwardBoyden表示,只需要使用簡單的光學顯微鏡,即可實現這項技術。神經科學家可以將大腦內電路的活動進行可視化,并將其與特定行為聯系起來。“如果想研究一種行為或疾病,就需要對神經元群體的活動進行成像,讓這些神經元群網絡中協同工作。”Boyden說。西安熒光鈣成像nVista鈣成像技術被廣泛應用于同時監測成百上千個神經元內鈣離子的變化。
紫外光激發Ca2+熒光探針Fura-2和Indo-1都是紫外光激發的雙波長Ca2+熒光指示劑,也是目前較常用的比率型鈣離子熒光探針。與其他代的熒光指示劑相比,它們的熒光信號更強,對Ca2+的選擇性也更強。比率指示劑會在與Ca2+結合后會改變吸收/發射特性。以雙波長激發指示劑Fura-2為例。如圖2所示,低Ca2+濃度下,Fura-2在~380nm處激發,高Ca2+濃度下,在~340nm處激發。光譜由兩個峰組成:左側較短波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而增大,右側較長波長的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而減小。通過340/380nm交替激發,獲取在510nm處對應的發射光熒光強度的比率,就可以對Ca2+濃度進行定量的測量。因為Fura-2結果準確,且不易被漂白,所以得到了普遍使用。
鈣離子在很多生理活動中都發揮著重要作用,除了在肌肉細胞收縮中扮演著重要角色,鈣離子也是神經元活動的重要“風向標”之一:當神經元膜電位發生去極化,產生的動作電位傳導到神經元軸突末梢時,細胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,大量鈣離子內流,包含神經遞質的囊泡由突觸前膜釋放至后膜,下游神經元就得以接受到上游的信號。因此,鈣離子成像可以追蹤神經元動作電位,從而幫助我們了解神經元集群的活動,可以用于感知覺,學習記憶,社會性行為等各種各樣的研究中雙光子熒光顯微鏡能夠在進行活動動物成像的時候實現高分辨率和高信噪比。
想要對鈣離子的動態變化進行有效的檢測,鈣離子指示劑的選擇顯得尤為重要。鈣離子熒光指示劑在未結合鈣離子前幾乎無熒光,與鈣離子結合后,熒光強度xianzhu增強。利用這一原理,可以通過指示劑的信號強弱來觀察細胞內鈣離子濃度水平的變化。根據激發光波長范圍,鈣離子指示劑可以分為可見光激發和紫外光激發,而根據其工作原理又可以分為比率和非比率型。常見的鈣離子指示劑有以下幾種:紫外光激發Ca2+熒光探針、可見光激發Ca2+熒光探針、轉基因Ca2+指示劑。傳統鈣成像實驗要求成像的光路極為穩定。重慶超微顯微鈣成像價位
神經元鈣成像的原理是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經元中鈣離子濃度的變化通過熒光強度表現出來。重慶超微顯微鈣成像價位
利用鈣成像技術記錄大腦活動。隨著功能光學成像技術的發展,神經學家們已經可以研究腦區和神經元內部的工作情況。功能鈣成像技術就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號和生理現象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細胞內游離鈣離子濃度,以此daibiao細胞的功能狀態。目前它被廣泛應用于實時監測一群相關神經元內鈣離子的變化,從而判斷其功能活動。該技術的出現使得科學家可以親眼目睹神經信號在神經網絡之中時間和空間上的傳遞穿梭。重慶超微顯微鈣成像價位