n摻雜可以明顯影響碳點(CDs)的發射和激發特性，使雙光子碳點(TP-CDs)具有本征雙光子激發特性和605nm紅光發射特性。在638nm激光的照射下，除了長波激發和發射外，還能產生活性氧，這為光動力技術提供了極大的可能性。更重要的是，各種表征和理論模擬證實了摻雜誘導的N雜環在TP-CDs與RNA的親和力中起著關鍵作用。這種親和力不僅可以實現核仁特異性的自我靶向，還可以通過ROS斷裂RNA鏈來解離TP-CDs@RNA復合物，從而在治療過程中產生熒光變化。TP-CDs結合了ROS產生的能力、PDT過程中的熒光變化、長波激發和發射特性以及核仁特異性自靶向性，因此可以認為是一種實時處理核仁動態變化的智能CDs。雙光子顯微鏡在多個領域研究中已有許多成功實例。激光雙光子顯微鏡成像視野一般是多少

剛好雙光子在這兩點具有很大的優勢在實際操作中成像的深度和樣品的關系很大，雙光子成像利用高亮度的熒光標記材料，已經有做到mm級別的穿透深度HighqualitycellularTPimagingwithhighsignal-to-backgroundratio(>100)andtissueimagingwithapenetrationdepthof2200μmhavebeenachievedwithP-QDasprobe.ExtremelyHighBrightnessfromPolymer-EncapsulatedQuantumDotsforTwo-photonCellularandDeep-tissueImaging:ScientificReports:NaturePublishingGroup國外ultima雙光子顯微鏡授權供應商雙光子顯微鏡只有焦平面處才能形成雙光子吸收，而焦平面之外由于光強低無法被發動，所以雙光子成像更清晰。

隨著技術的發展，雙光子顯微鏡的性能得到不斷地優化，結合它的特點，大致可以分成深和活兩個方面的提升。要想讓激發激光進入更深的層面，大致可從兩個方面入手，裝置優化與標本改造。關于裝置優化，我們可以把激光束變得更細，使能量更加集中，就能讓激光穿透更深。關于標本，其中影響光傳播的主要是物質吸收和散射，解決這個問題，我們需要對樣本進行透明化處理。一種方法是運用某種物質將標本浸泡，使其中的物質（主要是脂質）被破壞或溶解。另一種方法是運用電泳將脂質電解，讓標本“透明度”提高。

雙光子熒光顯微鏡是結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發技術的一種新技術。雙光子激發的基本原理是:在高光子密度的情況下，熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子，在經過一個很短激發態后，發射出一個波長較短的光子;其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去激發熒光分子是相同的。因其光損傷小、使得觀察熒光細胞成為可能。中國醫學科學院醫學實驗動物研究所-雙光子顯微鏡成像平臺借助于雙光子顯微鏡成像技術及不同轉基因小鼠開展對多種臟器的成像研究。以小鼠顱內成像為優勢，可觀察小鼠顱內神經細胞、小膠質細胞/巨噬細胞、周細胞、血管、轉移瘤細胞、膠質瘤細胞等的變化情況，在**學、神經生物學、發育生物學、神經退行性疾病等領域具有廣泛應用。小鼠其它組織臟器，如脾、顱骨、股骨、胸骨等也可借助本平臺進行成像研究。雙光子顯微鏡可以用于局部微蝕鐳射磨皮后的膠原重塑的檢測。

雙光子顯微鏡是結合了雙光子激發技術和激光掃描共聚顯微鏡的一種新型熒光顯微鏡，其原理大致是這樣的：首先，讓我們來看看什么是熒光顯微鏡。熒光顯微鏡是以紫外線為光源，照射被檢物體上的熒光物質或是熒光染料，使其發出熒光。相比普通光學顯微鏡，熒光顯微鏡運用了波長更短的紫外線，再將可見光過濾掉，提高了分辨力率。而當被檢物體過厚時，從不同深度發出的熒光都會打在物鏡上，使觀察到的像模糊、發虛，無法清楚的知道被檢物體的結構。而激光掃描共聚顯微鏡就是在熒光顯微鏡的基礎上，增加了激光掃描裝置，從而解決了上述問題。激光共聚掃描顯微鏡脫離了傳統光學顯微鏡的場光源和局部平面成像模式，采用激光束作光源，激光束經照明孔，經由分光鏡反射至物鏡，并聚焦于樣品上，對標本焦平面上每一點進行掃描。組織樣品中的熒光物質受到刺激后發出的熒光經原來入射光路直接反向回到分光鏡，通過探測孔時先聚焦，然后被光探頭收集，轉化為信號輸送到計算機進行處理。這個裝置能讓通過探測***的只有焦平面上發出的熒光，使成像更為清晰準確，同時通過改變物鏡的焦距，能對不同焦平面進行掃描，通過計算機繪出普通顯微鏡無法觀測的三維圖像。雙光子顯微鏡能夠進行光裂解、光轉染和光損傷等光學操縱。國外熒光激光雙光子顯微鏡成像技術

于雙光子激發需要兩個光子同時到達，因此只有在焦點附近的樣品區域才會激發，從而實現三維成像和高分辨率。激光雙光子顯微鏡成像視野一般是多少

隨著技術的發展，雙光子顯微鏡的性能不斷優化。結合其特點，大致可以分為兩個方面:深入和主動改進。為了使激發激光進入更深的層次，可以從器件優化和標本改造兩個方面入手。關于器件的優化，我們可以把激光束做得更細，集中能量，讓激光穿透得更深。對于樣品，物質的吸收和散射是影響光傳播的主要因素。為了解決這個問題，我們需要將樣本透明化。一種方法是用某種物質浸泡標本，使其中的物質(主要是脂質)被破壞或溶解。另一種方法是通過電泳電解脂類，從而提高標本的“透明度”。激光雙光子顯微鏡成像視野一般是多少