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Ultima 2P Plus多光子顯微鏡數據處理

來源: 發布時間:2024-02-21

    多光子激光掃描顯微鏡行業發展,世界多光子激光掃描顯微鏡產業主要布局在德國和日本,德國是以徠卡顯微系統和蔡司為,而日本以尼康和奧林巴斯公司為,2020年,上述企業占據著世界多光子激光掃描顯微鏡市場64.44%的市場份額,其發展戰略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向。目前世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長,中國市場這方面的需求增長更快,未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發展在中國將具有很大的發展潛力。滔博生物多光子顯微鏡廣應用于生命科學、生物醫學和材料科學領域!Ultima 2P Plus多光子顯微鏡數據處理

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快速光柵掃描有多種實現方式,使用振鏡進行快速2D掃描,將振鏡和可調電動透鏡結合在一起進行快速3D掃描,但可調電動透鏡由于機械慣性的限制在軸向無法快速進行焦點切換,影響成像速度,現可使用空間光調制器(SLM)代替。遠程聚焦也是一種實現3D成像的手段,如圖2所示。在LSU模塊中,掃描振鏡進行橫向掃描,ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,通過調控M的位置實現軸向掃描。該技術不僅可以校正主物鏡L2引入的光學像差,還可以進行快速的軸向掃描。想要獲得更多神經元成像,可以通過調整顯微鏡的物鏡設計來擴大FOV,但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大,無法快速移動以進行快速軸向掃描,因此大型FOV系統依賴于遠程聚焦、SLM和可調電動透鏡。美國多光子顯微鏡設備多光子顯微鏡是一種強大的顯微鏡技術,具有廣泛的應用前景和發展潛力。

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對于雙光子(2P)成像,散焦和近表面熒光激發是兩個相對較大的深度限制因素,而對于三光子(3P)成像,這兩個問題**減少。  然而,由于熒光團的吸收截面遠小于2P,三光子成像需要更高的脈沖能量才能獲得與2P相同激發強度的熒光信號。  功能性3P顯微鏡比結構性3P顯微鏡要求更高,后者需要更快的掃描速度以便及時采樣神經元活動。  為了在每個像素的停留時間內收集足夠的信號,需要更高的脈沖能量。  復雜的行為通常涉及大規模的大腦神經網絡,這些網絡既有本地連接,也有遠程連接。  為了將神經元的活動與行為聯系起來,需要同時監測* * *分布的超大型神經元的活動。  大腦中的神經網絡將在幾十毫秒內處理輸入的刺激。  為了理解這種快速神經元動力學,MPM需要快速成像神經元的能力。  快速MPM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術。  

2020年,TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM軸向掃描速度的方法[2]。在光學顯微鏡中,物鏡或樣品緩慢的軸向掃描速度限制了體成像的速度。近年來,通過使用遠程聚焦技術或電調諧透鏡(ETL)已經實現了快速軸向掃描。但遠程對焦時對反射鏡的機械驅動會限制軸向掃描速度,ETL會引入球差和高階像差,無法進行高分辨率成像。為了克服這些限制,該小組引入了一種新的光學設計,可以將橫向掃描轉換為無球面像差的軸向掃描,以實現高分辨率成像。有兩種方法可以實現這種設計。***個可以執行離散的軸向掃描,另一個可以執行連續的軸向掃描。如圖3a所示,特定裝置由兩個垂直臂組成,每個臂具有4F望遠鏡和物鏡。遠程聚焦臂由振鏡掃描鏡(GSM)和空氣物鏡(OBJ1)組成,另一個臂(稱為照明臂)由浸沒物鏡(OBJ2)組成。兩個臂對齊,使得GSM與兩個物鏡的后焦平面共軛。準直后的激光束經偏振分束器反射進入遠程聚焦臂,由GSM進行掃描,使OBJ1產生的激光焦點可以進行水平掃描。多光子顯微鏡是一款針對厚樣本進行深層成像的利器,特別是在實驗中。

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現代分子生物學技術的迅速發展和科技的進步,特別是隨著后基因組時代的到來,人們已經能夠根據需要建立各種細胞模型,為在體研究基因表達規律、分子間的相互作用、細胞的增殖、細胞信號轉導、誘導分化、細胞凋亡以及新的血管生成等提供了良好的生物學條件。然而,盡管人們利用現有的分子生物學方法,已經對基因表達和蛋白質之間的相互作用進行了深入、細致的研究,但仍然不能實現對蛋白質和基因活動的實時、動態監測。在細胞的生理過程中,基因、尤其是蛋白質的表達、修飾和相萬作用往往發生可逆的、動態的變化。目前的分子生物學方法還不能捕獲到蛋白質和基因的這些變化,但獲取這些信息對與研究基因的表達和蛋白質之間的相互作用又至關重要。因此,發展能用于、動態、實時、連續監測蛋白質和基因活動的方法是非常必要的。高速掃描和高分辨率的完美結合,多光子顯微鏡提高樣品處理速度和精度。bruker多光子顯微鏡三維分辨率

由于其非侵入性和高分辨率的特點,多光子顯微鏡在神經科學、ai癥研究、免疫學等領域發揮了重要作用。Ultima 2P Plus多光子顯微鏡數據處理

國內顯微鏡制造市場目前斷層嚴重。目前我國顯微鏡行業發展缺乏技術沉淀,20年以上經營積累的企業十分稀缺,深度精密制造、光學主要部件設計及工藝嚴重制約產業升級。目前中國顯微鏡中如多光子顯微鏡、共聚焦掃描和電子顯微鏡等主要集中在徠卡顯微系統、蔡司、尼康、奧林巴斯等國外企業。國內具備生產顯微鏡能力的企業屈指可數,若國內顯微鏡企業能打破技術壁壘,切入顯微鏡市場,企業的生產經營將騰躍至一個更高的格局。未來國產多光子激光掃描顯微鏡替代空間大。目前中國使用的多光子激光掃描顯微鏡幾乎被徠卡顯微系統、蔡司、尼康和奧林巴斯壟斷。國內有能力開始生產多光子激光掃描顯微鏡的企業極少,若國內能夠制造出高性能、高可靠性的多光子激光掃描顯微鏡,無異是會面臨極大的市場機遇。Ultima 2P Plus多光子顯微鏡數據處理

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