培養基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自獨自的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。全自動培養基制備儀主要特點:溫度探頭測量培養基實際溫度,控溫很準!大容量 培養基制備器品牌
培養基制備方法與注意事項:1、培養基配方選擇同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養基制備記錄每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。3、培養基成份稱量培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,好好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。河南培養基制備器售后Systec培養基制備器采用模塊化設計,適配多種培養基類型需求。
血清培養基主要問題:血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌有毒的等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。動物個體不同,血清產地、批號不同,每批質量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響,可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。大規模生產中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。
培養基中血清的質量標準:血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規程執行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。《用動物細胞體外培養生產生物制品規程》中的要求:牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的抑制物。血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。對細胞有良好的支持繁殖作用。理想設備應在10~15分鐘內達到121°C(如高壓滅菌鍋)或快速溶解瓊脂(如帶攪拌的培養基制備儀)。
培養基制備操作步驟:(一)準確稱量試劑根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。(二)校正pH值將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調節pH值到適宜范圍內。(三)過濾將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。(四)分裝將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。(五)滅菌培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到徹底滅菌的目的。密封式罐體設計有效避免外界微生物污染風險。 預設程序支持個性化參數存儲,便于重復實驗調用。培養基制備器售后服務
**電加熱**(帶溫控的磁力攪拌器):建議選擇功率可調、加熱均勻的型號。大容量 培養基制備器品牌
培養基制備基本方法:培養基各成份的混合和溶化,培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。很好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,必須加以補足。大容量 培養基制備器品牌