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湖南Systec培養基制備器

來源: 發布時間:2024-03-19

培養基配置原則:控制pH條件,當培養基中酸性物質積累導致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物,培養基pH不會過度降低;如果培養基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物,培養基pH也不會過度升高。但KH2PO4和K2HPO4緩沖系統只能在一定的pH范圍內(6.4-7.2)起調節作用。有些微生物,如乳酸菌能大量產酸,上述緩沖系統就難以起到緩沖作用,此時可在培養基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來進行調節,CaCO3難溶于水,不會使培養基pH過度升高,但它可以不斷中和微生物產生的酸,同時釋放出CO2,將培養基pH控制在一定范圍內。在培養基中還存在一些天然的緩沖系統,如氨基酸、肽、蛋白質都屬于兩性電解質,也可起到緩沖劑的作用。制備培養基的操作要點:成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,。湖南Systec培養基制備器

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培養基配制:素:為防止培養時期細菌的污染,可在培養基中添加適當素,一般用量與組織細胞培養相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的細胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細胞,但在離體培養過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖,蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質起凝集作用。PHA的細胞數隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細胞均被為止,但PHA濃度過高會引起凝集,一般采用4%濃度為好。自動培養基制備器培養基制備器小倒管浸滿培養基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。

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配制培養基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養物,培養基必須及時嚴格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對糖類要求更高的培養基,可先將糖過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。長時間高溫滅菌也會使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產生沉淀。為了防止這類沉淀發生,可將這些物質分別滅菌,冷卻后再混合;也可在培養基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡合物,防止沉淀的產生。高壓蒸汽滅菌一般使培養基pH降低,應在配制培養基時加以調節。

天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。常用的天然有機營養物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養基成本較低,除在實驗室經常使用外,也適于用來進行工業上大規模的微生物發酵生產。組合培養基合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如,高氏1號培養基和查氏培養基等。合成培養基有一定的配方,配制合成培養基時重復性強,但與天然培養基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。半組合培養基指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養基。培養基制備器具有液量分配,時間分配,復制分配三種工作模式。

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配制培養基需要哪些制備:(1)稱出規定數量的瓊脂和蔗糖,加水直到培養基較終容積的34,加熱溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養基(不加瓊脂)時無需加熱。(2)按需要加入一定量的各種貯存母液,包括生長調節物質和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要,培養基中所需的維生素,可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。(3)蒸餾水定容。充分混合后調節培養基的pH,一般以5.66.0為好。(4)培養基分裝,分裝量一般以占培養容器的1514為宜。之后在24h內完成高壓滅菌,也可以高壓滅菌后再進行培養基的無菌分裝,室溫下存放備用。暫時不用的培養基應放置于10攝氏度下保存,而含有生長調節物質的培養基在45攝氏度保存更佳。制備培養基的操作要點:半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。廣西瓊脂培養基 培養基制備器

培養基的實驗室制備:正確制備培養基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。湖南Systec培養基制備器

微生物檢驗培養基制備的要點:調培養基pH,雖然中海培養基中含有緩沖物質,可以盡量使培養基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。如果沒有,可以使用精確的pH試紙,然后根據需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進行微調。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進行調整至所需的pH值。培養基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質,將pH調至比要求值高0.1~0.2個單位,因為用氫氧化鈉調節時,高壓滅菌后介質的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養基中含有碳酸鈣,則無需調整pH值。湖南Systec培養基制備器

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