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AN厭氧瓊脂基礎(chǔ)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-12

在食品微生物學(xué)領(lǐng)域,Baird-Parker瓊脂培養(yǎng)基已成為金黃色葡萄球菌檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)方法。其應(yīng)用范圍涵蓋乳制品、肉制品、速凍食品等復(fù)雜基質(zhì)樣本。例如,在生鮮肉類(lèi)檢測(cè)中,培養(yǎng)基中的甘氨酸能中和樣本中殘留的表面活性劑干擾;而卵黃成分的乳化作用可有效分散脂肪顆粒,減少假陰性結(jié)果。研究還拓展了其在即時(shí)檢測(cè)(POCT)中的應(yīng)用:通過(guò)預(yù)灌裝脫水培養(yǎng)基片劑與便攜式恒溫孵育箱結(jié)合,可在野外或生產(chǎn)線現(xiàn)場(chǎng)實(shí)現(xiàn)48小時(shí)內(nèi)完成定量檢測(cè),檢測(cè)限低至1CFU/g(經(jīng)MPN法驗(yàn)證)。與傳統(tǒng)PCR或免疫學(xué)方法相比,Baird-Parker培養(yǎng)法的優(yōu)勢(shì)在于兼顧成本效益與可靠性。一項(xiàng)多中心研究顯示,其與分子檢測(cè)(如nuc基因擴(kuò)增)的一致性達(dá)93.7%,而單樣本檢測(cè)成本為后者的1/5。此外,培養(yǎng)基支持自動(dòng)化菌落計(jì)數(shù)儀的圖像分析,通過(guò)算法識(shí)別黑色菌落與溶血環(huán)特征,將人工判讀誤差率從15%降至2%以下。麥康凱瓊脂基礎(chǔ)是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于糞便、分泌物中腸道致病菌及腸球菌的分離培養(yǎng) 。AN厭氧瓊脂基礎(chǔ)

培養(yǎng)基

乳糖肉湯是一種經(jīng)典的微生物培養(yǎng)基,廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的增菌和發(fā)酵特性檢測(cè)。其配方簡(jiǎn)單而高效,主要成分包括乳糖、蛋白胨、牛肉浸粉和氯化鈉。乳糖作為主要的碳源,能夠被許多細(xì)菌發(fā)酵,產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,從而改變培養(yǎng)基的pH值。蛋白胨和牛肉浸粉則為細(xì)菌生長(zhǎng)提供了豐富的氮源和生長(zhǎng)因子,支持細(xì)菌的快速繁殖。氯化鈉則維持培養(yǎng)基的滲透壓,確保細(xì)菌在適宜的環(huán)境中生長(zhǎng)。乳糖肉湯的設(shè)計(jì)原理基于細(xì)菌對(duì)乳糖的發(fā)酵能力。在發(fā)酵過(guò)程中,細(xì)菌將乳糖分解為酸性產(chǎn)物,導(dǎo)致培養(yǎng)基的pH值下降。這種pH變化可以通過(guò)添加酸堿指示劑(如溴甲酚紫)來(lái)觀察。當(dāng)培養(yǎng)基中的乳糖被發(fā)酵時(shí),溴甲酚紫的顏色會(huì)從紫色變?yōu)辄S色,從而直觀地指示細(xì)菌的發(fā)酵活性。這種特性使得乳糖肉湯在檢測(cè)腸道致病菌(如大腸桿菌和沙門(mén)氏菌)時(shí)表現(xiàn)出色,因?yàn)檫@些細(xì)菌通常能夠發(fā)酵乳糖并產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物。馬丁培養(yǎng)基葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富蛋白胨和酵母浸出粉提供氮源和生長(zhǎng)因子,葡萄糖作為碳源,促進(jìn)微生物快速生長(zhǎng)。

AN厭氧瓊脂基礎(chǔ),培養(yǎng)基

RV沙氏增菌肉湯(Rappaport-Vassiliadis Enrichment Broth,簡(jiǎn)稱RV肉湯)是一種專為沙門(mén)氏菌選擇性增菌而設(shè)計(jì)的液體培養(yǎng)基。其配方設(shè)計(jì)基于沙門(mén)氏菌的生物學(xué)特性,通過(guò)優(yōu)化營(yíng)養(yǎng)成分和抑制劑的組合,實(shí)現(xiàn)對(duì)沙門(mén)氏菌的高效增菌。RV肉湯的主要成分包括大豆蛋白胨、氯化鎂、氯化鈉、磷酸鹽緩沖劑和少量孔雀綠。大豆蛋白胨提供豐富的碳源和氮源,支持細(xì)菌的快速生長(zhǎng);氯化鎂和氯化鈉維持高滲透壓,抑制其他腸桿菌科細(xì)菌的生長(zhǎng);低pH值和孔雀綠則進(jìn)一步增強(qiáng)對(duì)非沙門(mén)氏菌的抑制作用。RV肉湯的配方經(jīng)過(guò)多次改良,減少了孔雀綠的使用量,降低了毒性,同時(shí)保持了高效的選擇性。這種優(yōu)化不僅提高了培養(yǎng)基的安全性,還使其在復(fù)雜的樣本中能夠更有效地分離沙門(mén)氏菌。研究表明,RV肉湯在短時(shí)間內(nèi)能夠增加沙門(mén)氏菌的數(shù)量,同時(shí)有效抑制大腸桿菌、變形桿菌等常見(jiàn)雜菌的生長(zhǎng)。此外,RV肉湯的配方還考慮到了沙門(mén)氏菌的代謝特性,通過(guò)調(diào)節(jié)pH值和滲透壓,為沙門(mén)氏菌提供了理想的生長(zhǎng)環(huán)境。這種配方設(shè)計(jì)使得RV肉湯在分離和增菌沙門(mén)氏菌方面表現(xiàn)出色,優(yōu)于其他同類(lèi)增菌培養(yǎng)基,如四硫磺酸鹽肉湯(TTB)和亞硒酸鹽肉湯。

溴十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于微生物檢測(cè)領(lǐng)域,尤其適用于從臨床樣本、環(huán)境樣本和食品樣本中分離和鑒定銅綠假單胞菌。其高度選擇性的特性使其成為檢測(cè)銅綠假單胞菌的理想工具,尤其在需要快速篩選和鑒定該菌的場(chǎng)景中表現(xiàn)出色。在實(shí)驗(yàn)操作中,溴十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基的制備過(guò)程簡(jiǎn)單且易于操作。通常將45.3g培養(yǎng)基干粉溶解于1000mL純化水中,加入10mL甘油,加熱煮沸至完全溶解后,分裝至三角瓶中,121℃高壓滅菌15分鐘。滅菌后,培養(yǎng)基應(yīng)在50℃時(shí)傾注至無(wú)菌平皿中備用。需要注意的是,培養(yǎng)基中含少量氯化鎂,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀,但不影響使用。在實(shí)際應(yīng)用中,樣本接種后通常在30-35℃下需氧培養(yǎng)18-72小時(shí)。銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,形成的菌落通常呈現(xiàn)黃綠色,具有較高的辨識(shí)度。此外,該培養(yǎng)基還可與其他檢測(cè)方法結(jié)合使用,如分子生物學(xué)方法(如PCR)和生化鑒定方法,進(jìn)一步提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)培養(yǎng)基緩沖體系穩(wěn)定pH值維持在7.2±0.2,為微生物生長(zhǎng)提供適宜環(huán)境,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高。

AN厭氧瓊脂基礎(chǔ),培養(yǎng)基

富集培養(yǎng)基是一種在微生物學(xué)中用于從復(fù)雜微生物群落中選擇性培養(yǎng)目標(biāo)微生物的培養(yǎng)基。其主要特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1.**選擇性培養(yǎng)**:富集培養(yǎng)基通過(guò)增加特定營(yíng)養(yǎng)條件或改變環(huán)境條件,從復(fù)雜的微生物群落中選擇性地培養(yǎng)出目標(biāo)微生物。這種培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)基于不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用能力和生長(zhǎng)特性的差異,利用這些差異來(lái)選擇性地培養(yǎng)出目標(biāo)微生物。2.**目標(biāo)微生物特性**:富集培養(yǎng)基的制備需要明確目標(biāo)微生物的特性和所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。目標(biāo)微生物可能對(duì)某種特定的碳源、氮源或微量元素有特殊的需求。因此,在富集培養(yǎng)的過(guò)程中,需要選擇適當(dāng)?shù)母患囵B(yǎng)基,以提供目標(biāo)微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。3.**抑制其他微生物**:在富集培養(yǎng)基中,可以添加一些抑制其他微生物生長(zhǎng)的物質(zhì),以防止其他微生物的干擾。4.**培養(yǎng)條件**:富集培養(yǎng)需要合適的培養(yǎng)條件。不同微生物對(duì)溫度、pH值和氧氣需求有所不同,因此在富集培養(yǎng)中需要根據(jù)目標(biāo)微生物的需求來(lái)調(diào)節(jié)這些條件。5.**應(yīng)用廣**:富集培養(yǎng)基在工業(yè)微生物產(chǎn)生菌的分離篩選中非常重要,尤其是在從微生物混合群中引向純培養(yǎng)的一種培養(yǎng)方法。例如,杜宗軍教授課題組設(shè)計(jì)了新的富集培養(yǎng)基和富集條件,分離出了大量的海洋細(xì)菌新類(lèi)群。該培養(yǎng)基質(zhì)地均勻,透明度高,便于觀察菌落形態(tài),瓊脂凝固性好,穩(wěn)定性強(qiáng)適合長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果清晰可靠。EB肉湯增菌液添加劑B

連四硫酸鹽成分獨(dú)特,增強(qiáng)目標(biāo)菌特征反應(yīng),檢測(cè)信號(hào)更明顯,為微生物鑒定和研究提供有力支持。AN厭氧瓊脂基礎(chǔ)

在臨床微生物學(xué)領(lǐng)域,Vogel-Johnson瓊脂被廣用于耐藥性金黃色葡萄球菌(如MRSA)的快速篩查。一項(xiàng)多中心研究顯示,使用VJ瓊脂對(duì)200例術(shù)后樣本進(jìn)行檢測(cè),與PCR確認(rèn)結(jié)果的一致性達(dá)92%,高于血瓊脂(78%)和MSA(85%)。其顯色反應(yīng)可在18–24小時(shí)內(nèi)完成初步鑒定,縮短了傳統(tǒng)生化試驗(yàn)所需的48–72小時(shí)周期。在食品安全領(lǐng)域,VJ瓊脂被納入ISO 6888-1標(biāo)準(zhǔn),用于食品中金黃色葡萄球菌的定量檢測(cè)。例如,在乳制品檢測(cè)中,VJ瓊脂可有效抑制乳酸菌和芽孢桿菌的干擾,同時(shí)通過(guò)黃色暈圈清晰區(qū)分產(chǎn)菌株(如金黃色葡萄球菌)。研究還表明,在即食肉類(lèi)樣本中,VJ瓊脂的檢測(cè)限低至10 CFU/g(經(jīng)增菌后),符合歐盟法規(guī)(EC No. 2073/2005)對(duì)即食食品的微生物安全要求。此外,其高選擇性減少了后續(xù)確證試驗(yàn)(如凝固酶試驗(yàn))的工作量,降低了實(shí)驗(yàn)室成本。AN厭氧瓊脂基礎(chǔ)

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