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相較于傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基(如Baird-Parker瓊脂或MSA),Vogel-Johnson瓊脂在特異性、靈敏度及操作便捷性上具有優(yōu)勢(shì)。以Baird-Parker瓊脂為例,其依賴卵黃亞碲酸鹽的協(xié)同抑制機(jī)制,雖能區(qū)分金黃色葡萄球菌的脂酶活性,但存在制備復(fù)雜(需添加卵黃乳液)、假陽(yáng)性率高(某些凝固酶陰性葡萄球菌亦可生長(zhǎng))等問(wèn)題。而VJ瓊脂通過(guò)化學(xué)抑制劑與顯色反應(yīng)的結(jié)合,無(wú)需額外添加試劑即可實(shí)現(xiàn)目視鑒別。與MSA相比,VJ瓊脂的甘露醇濃度更高(10 g/L vs. 7.5 g/L),且添加甘氨酸進(jìn)一步提升了選擇性。一項(xiàng)頭對(duì)頭試驗(yàn)表明,在含有高濃度腸道菌群(如大腸桿菌和變形桿菌)的糞便樣本中,VJ瓊脂的金黃色葡萄球菌回收率比MSA高30%。近年來(lái),部分廠商還開(kāi)發(fā)了改良型VJ瓊脂,如添加頭孢西丁(cefoxitin)以增強(qiáng)對(duì)MRSA的選擇性,或引入熒光標(biāo)記探針實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測(cè)。這些技術(shù)創(chuàng)新鞏固了VJ瓊脂在快速診斷領(lǐng)域的地位。SH 培養(yǎng)基具備出色的酸堿緩沖能力,能夠在微生物生長(zhǎng)過(guò)程中維持相對(duì)穩(wěn)定的 pH 值。改良COMBO培養(yǎng)基添加劑D(硫胺素溶液)
RV沙氏增菌肉湯廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境樣本和臨床樣本中沙門(mén)氏菌的檢測(cè)與分離。其高度選擇性的特性使其成為從復(fù)雜樣本中分離沙門(mén)氏菌的理想工具。在食品檢測(cè)中,RV肉湯常用于檢測(cè)肉類(lèi)、蛋類(lèi)、乳制品和加工食品中的沙門(mén)氏菌。在環(huán)境微生物學(xué)中,RV肉湯可用于檢測(cè)水樣、土壤樣本中的沙門(mén)氏菌。在臨床檢測(cè)中,RV肉湯可用于檢測(cè)糞便樣本中的沙門(mén)氏菌,幫助診斷沙門(mén)氏菌。在實(shí)驗(yàn)操作中,RV肉湯的制備過(guò)程簡(jiǎn)單:將27.1g干粉溶解于1000mL蒸餾水中,加熱攪拌至完全溶解后,分裝試管并進(jìn)行115℃高壓滅菌20分鐘。這種制備方式不僅保證了培養(yǎng)基的無(wú)菌性,還確保了其成分的均勻分布。在實(shí)際應(yīng)用中,RV肉湯還可直接用于糞便樣本的沙門(mén)氏菌分離,無(wú)需預(yù)增菌,但需控制接種量。需要注意的是,RV肉湯不適用于分離傷寒沙門(mén)氏菌,此時(shí)需采用其他選擇性增菌培養(yǎng)基。RV肉湯的使用方法也較為靈活。在檢測(cè)食品樣本時(shí),通常將樣本經(jīng)過(guò)預(yù)處理后,接種到RV肉湯中,然后在42±1℃的條件下培養(yǎng)18-24小時(shí)。培養(yǎng)后,通過(guò)觀察培養(yǎng)液的渾濁度和顏色變化,初步判斷沙門(mén)氏菌的存在。隨后,可將培養(yǎng)液劃線接種到選擇性平板上改良桑塔基氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含2.5%NaCl)哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中穩(wěn)定性出色,不易受外界因素影響,保障細(xì)菌培養(yǎng)的質(zhì)量。
MS培養(yǎng)基氨基酸作用MS培養(yǎng)基含有多種氨基酸,對(duì)鏈霉菌有著多方面重要作用。氨基酸是構(gòu)建蛋白質(zhì)的基本單元,鏈霉菌利用培養(yǎng)基中的氨基酸合成各種功能蛋白,如參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的載體蛋白、催化生化反應(yīng)的酶蛋白等,這些蛋白質(zhì)決定了鏈霉菌的生長(zhǎng)、代謝與繁殖能力。像谷氨酸、天冬氨酸等非必需氨基酸,鏈霉菌可自身合成一部分,但培養(yǎng)基中的補(bǔ)充能減輕其合成負(fù)擔(dān),使其將更多能量用于其他生命活動(dòng)。而對(duì)于甲硫氨酸、賴氨酸等必需氨基酸,培養(yǎng)基的提供則是其生長(zhǎng)不可或缺的保障。此外,氨基酸還參與鏈霉菌體內(nèi)酶系的合成,如某些轉(zhuǎn)氨酶的合成離不開(kāi)特定氨基酸,這些酶又進(jìn)一步催化氨基酸之間的轉(zhuǎn)化與利用,形成一個(gè)相互關(guān)聯(lián)的代謝網(wǎng)絡(luò),為鏈霉菌在復(fù)雜的生長(zhǎng)環(huán)境中維持正常生理功能和持續(xù)生長(zhǎng)提供了堅(jiān)實(shí)的物質(zhì)基礎(chǔ)與生化支持。
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測(cè)細(xì)菌是否具有尿素酶活性的微生物培養(yǎng)基。其特點(diǎn)主要包括:1.**成分**:尿素培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、氯化鈉、磷酸二氫鉀、尿素、葡萄糖、酚紅指示劑和瓊脂等。蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀作為緩沖劑;尿素作為底物檢測(cè)細(xì)菌是否具有尿素酶活性;酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保證微生物的生長(zhǎng)環(huán)境和酶活性的發(fā)揮。3.**尿素酶檢測(cè)**:某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時(shí)變色(通常為粉紅色),通過(guò)觀察顏色變化來(lái)判斷細(xì)菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**:將除尿素和瓊脂以外的成分配好,并校正pH,加入瓊脂,加熱溶化并分裝。高壓滅菌后,冷至50~55℃,加入經(jīng)除菌過(guò)濾的尿素溶液,pH應(yīng)為7.2±0.1。分裝于滅菌試管內(nèi),放成斜面?zhèn)溆谩?.**應(yīng)用**:尿素培養(yǎng)基主要用于鑒定革蘭氏陰性菌中的尿素酶活性,如用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒定,例如大腸埃希菌和奇異變形桿菌等細(xì)菌具有尿素酶活性,而鮑曼不動(dòng)桿菌則不具備尿素酶活性。葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富蛋白胨和酵母浸出粉提供氮源和生長(zhǎng)因子,葡萄糖作為碳源,促進(jìn)微生物快速生長(zhǎng)。
XLD培養(yǎng)基在微生物檢測(cè)中的性能特點(diǎn)主要體現(xiàn)在其選擇性和鑒別能力上。首先,脫氧膽鹽的選擇性抑制作用能夠有效減少非目標(biāo)菌的干擾,使腸道致病菌在培養(yǎng)基上更容易生長(zhǎng)和被觀察到。這種選擇性不僅提高了檢測(cè)效率,還降低了背景菌落的復(fù)雜性,便于后續(xù)的菌落篩選和鑒定。其次,XLD培養(yǎng)基的鑒別能力同樣出色。木糖發(fā)酵試驗(yàn)和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)是其兩大鑒別功能。在XLD培養(yǎng)基上,沙門(mén)氏菌通常會(huì)發(fā)酵木糖并產(chǎn)生黃色菌落,而志賀氏菌則因不發(fā)酵木糖而呈現(xiàn)無(wú)色或淡黃色菌落。此外,賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)可以通過(guò)觀察培養(yǎng)基的pH變化來(lái)進(jìn)一步區(qū)分不同菌種。這種雙重鑒別機(jī)制為科研人員提供了準(zhǔn)確的菌種鑒定依據(jù),減少了對(duì)其他生化試驗(yàn)的依賴。在實(shí)際應(yīng)用中,XLD培養(yǎng)基用于食品衛(wèi)生檢測(cè)、臨床樣本分析以及環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。其性能使其成為微生物實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具,為保障公共衛(wèi)生安全和推動(dòng)微生物學(xué)研究提供了重要支持。麥康凱瓊脂基礎(chǔ)顏色會(huì)因細(xì)菌代謝產(chǎn)物而改變,有助于判斷細(xì)菌的種類(lèi)和生長(zhǎng)狀態(tài)。MS培養(yǎng)基(鏈霉菌)
亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基專(zhuān)為沙門(mén)氏菌選擇性分離設(shè)計(jì)能抑制大腸桿菌等雜菌生長(zhǎng)突出沙門(mén)氏菌的黑色金屬光澤菌落。改良COMBO培養(yǎng)基添加劑D(硫胺素溶液)
在臨床微生物學(xué)領(lǐng)域,Vogel-Johnson瓊脂被廣用于耐藥性金黃色葡萄球菌(如MRSA)的快速篩查。一項(xiàng)多中心研究顯示,使用VJ瓊脂對(duì)200例術(shù)后樣本進(jìn)行檢測(cè),與PCR確認(rèn)結(jié)果的一致性達(dá)92%,高于血瓊脂(78%)和MSA(85%)。其顯色反應(yīng)可在18–24小時(shí)內(nèi)完成初步鑒定,縮短了傳統(tǒng)生化試驗(yàn)所需的48–72小時(shí)周期。在食品安全領(lǐng)域,VJ瓊脂被納入ISO 6888-1標(biāo)準(zhǔn),用于食品中金黃色葡萄球菌的定量檢測(cè)。例如,在乳制品檢測(cè)中,VJ瓊脂可有效抑制乳酸菌和芽孢桿菌的干擾,同時(shí)通過(guò)黃色暈圈清晰區(qū)分產(chǎn)菌株(如金黃色葡萄球菌)。研究還表明,在即食肉類(lèi)樣本中,VJ瓊脂的檢測(cè)限低至10 CFU/g(經(jīng)增菌后),符合歐盟法規(guī)(EC No. 2073/2005)對(duì)即食食品的微生物安全要求。此外,其高選擇性減少了后續(xù)確證試驗(yàn)(如凝固酶試驗(yàn))的工作量,降低了實(shí)驗(yàn)室成本。改良COMBO培養(yǎng)基添加劑D(硫胺素溶液)