培養基的pH必須控制在一定的范圍內，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的較適pH條件各不相同，一般來講，細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內生長，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內生長。值得注意的是，在微生物生長繁殖和代謝過程中，由于營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累，會導致培養基pH發生變化，若不對培養基pH條件進行控制，往往導致微生物生長速度下降或（和）代謝產物產量下降。因此，為了維持培養基pH的相對恒定，通常在培養基中加入pH緩沖劑，常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽（如KH2PO4和K2HPO4）組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性，KH2PO4溶液呈酸性，兩種物質的等量混合溶液的pH為6.8。當培養基中酸性物質積累導致H+濃度增加時，H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物，培養基pH不會過度降低；如果培養基中OH-濃度增加，OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物，培養基pH也不會過度升高。在培養細胞時通常還需要添加藥物，以防止細菌污染。Campy-Cefex 瓊脂培養基基礎添加劑

通常用心、腦或其他臟器浸液配制厭氧菌培養基，并常需加入硫乙醇酸鈉、半胱氨酸、肉渣、還原鐵、活性炭等還原劑或除氧材料。在液體培養基中還可加入刃天青或亞甲基藍作為氧化還原指示劑，以觀察培養基的含氧程度。心、腦浸液、肝塊、肉渣中含有不飽和脂肪酸，能吸收培養基中的氧。硫乙醇酸鈉、半胱氨酸是較強的還原劑，能消耗溶解在培養基中的氧。干燥的活性炭和脫脂棉同樣能吸收培養基中的氧。所以培養基中加入還原劑和吸收材料，目的都是為造成培養基的缺氧環境，使培養基保持較低的氧化還原電勢。此外，還可在培養基表面加一層液體石蠟，以隔絕培養基與大氣的接觸。葡萄糖酵母浸粉蛋白胨瓊脂/GYP瓊脂液體培養基普遍應用于微生物菌株的生長、染色及細胞背景下的細胞培養等方面。

細菌培養基之牛肉膏瓊脂培養基：牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化鈉0.5g，瓊脂1.5g，水100ml在燒杯內加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉，用蠟筆在燒杯外作上記號后，放在火上加熱。待燒杯內各組分溶解后，加入瓊脂，不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水，用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到7.2-7.6，分裝在各個試管里，加棉花塞，用高壓蒸汽滅菌：1.05千克每平方厘米、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養基：取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀細細剁成肉末后，加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號，煮沸，轉用文火燉2小時。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調到7.5左右。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。

血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用：提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。為了避免細胞爆破釋放DNA和蛋白質，培養基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶類。

培養基的分類有幾種呢？按照培養基用途區分：1.基礎培養基，一類含有一般微生物生長繁殖所需基本營養物質的培養基。牛肉膏蛋白胨培養基是常用的基礎培養基。2.加富培養基，一類在基礎培養基中加入血、血清、動植物組織提取液制成的培養基。用于培養要求比較苛刻的某些微生物。3.選擇培養基，一類根據某微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能，普遍用于菌種篩選等領域。在實際應用過程中，常常需要調整培養基的組成和配方，以優化細胞或微生物的生長和功能表現。改良UVM增菌液基礎

細菌類培養基則包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基、麥芽瓊脂培養基等等。Campy-Cefex 瓊脂培養基基礎添加劑

培養細胞時應使用5%還是10%CO2，或者根本沒有影響？一般培養基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統，而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時，細胞培養時應使用10% CO2；當培養基中NaHCO3 為每公升1.5g時，則應使用5%CO2培養細胞。NaHCO3的作用：培養基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統，并采用開放培養，使細胞代謝產生的CO2及時溢出培養瓶，再通過穩定調節溫箱中CO2濃度（5%） ，與培養基中的NaHCO3處于平衡狀態，從而調節培養基的PH值。NEAA：非必須氨基酸，NEAA（非必需氨基酸） 是含幾種非必需氨基酸的合劑，添加到的原培養基不同，NEAA 也有不同的種類，比如添加至MEM的NEAA，含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。Campy-Cefex 瓊脂培養基基礎添加劑

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