鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當的骨修復材料是治好骨缺損的中心環節。目前,臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中,人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2],由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白,其臨床療效遠遠低于自體骨組織。但是,自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織,數量有限,難以滿足臨床需要。因此,研發與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料,成為全世界骨組織工程學者孜孜以求的目標。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產物,在分子結構上,羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長。本研究仿生天然骨組織的分子結構,酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白,重構形成Ⅰ型膠原纖維,然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內骨生物礦化,通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內部的骨生物礦化。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。為了盡可能減少對動物的傷害和方便試驗人員的操作,剪下一小段鼠尾是一個不錯的選擇。徐州正規鼠尾膠原哪家便宜
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。3.稀釋一定數量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養瓶。在室溫或37度結合數小時或者2-8度過夜。鄭州鼠尾膠原價格稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中。
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養皿(實驗組)和普通培養皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態,應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態,流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。結果與結論:兩組培養皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態明顯加重,細胞存活率及細胞內過氧化氫活力明顯下降,細胞凋亡率及細胞內丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。
鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養基和一種天然的黏附劑。實驗設備及材料:大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實驗內容:1、制備鼠尾膠原(兩個同學一組操作)。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。制備鼠尾膠原:1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘;2、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的,折斷尾骨后拉出尾腱;3、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡;4、重復步驟2、3,直至尾腱量夠用;5、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克);6、將尾腱置于平皿內剪碎,轉移至三角燒瓶中;7、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液;8、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期;9、離心,4000轉/分,10-15分鐘;10、吸取上清,分裝成小瓶,4℃保存。膠原蛋白是一種蛋白質,能幫助連接皮膚,骨頭和肌腱等身體組織。
生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無菌的環境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結構。制備鼠尾膠原:吸取上清,分裝成小瓶,4℃保存。太原正規鼠尾膠原生產廠家
鼠尾膠原醋酸溶解:按照6-10ug/cm2的濃度包被培養瓶。徐州正規鼠尾膠原哪家便宜
鼠尾膠原是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時它也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。通過本實驗可掌握鼠尾膠原的制備方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾膠原將其固定于培養瓶內。實驗設備及材料:大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實驗內容:1、制備鼠尾膠原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養瓶內。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。徐州正規鼠尾膠原哪家便宜