研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成，并初步闡明其分子機制。研究加深了對瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認識，為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對象，從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體，并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部，并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進行對照。研究發(fā)現(xiàn)，瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5p)壓制血管內(nèi)皮細胞VEGF受體(VEGFR2)的表達從而阻斷血管生成的信號通路。這些發(fā)現(xiàn)加深了人們對瘧原蟲抗病機理的理解，并為瘧原蟲療法治病一些疾病的臨床研究提供進一步的理論依據(jù)。機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑。太原正規(guī)外泌體提取試劑供應商

2018版《指導要求》說明外泌體沒有限定單一的分離手段，多種手段都可以進行細胞外囊泡的富集。《指導要求》編寫者們認為“高回收率，低特異性”的富集手段是指那些富集囊泡的同時會有大量的非囊泡組分被富集，甚至細胞的整個分泌組都會被摻入其中，歸入這一類的分離手段主要包括通過改變電荷或通過高聚物作用的沉淀試劑盒、低分子量截流的超濾分離、超長時間和超高離心力的超速離心等。Wako的MagCapture?ExosomeIsolationKitPS（產(chǎn)品編號299-77603（2tests），293-77601（10tests）），使用PS親和法對外泌體進行提取，損失小且能獲得高純度的外泌體。徐州外泌體提取試劑廠家批發(fā)價外泌體的提取方法：色譜法。

外泌體與免疫系統(tǒng)：不同的細胞來源的外泌體，包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質(zhì)細胞，釋放出帶有載體的外泌體，可影響先天免疫系統(tǒng)和適應性免疫系統(tǒng)中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響，刺激或壓制其增殖和功能。外泌體與代謝性和心血管疾病：外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細胞收集的外泌體與疾病相關的代謝適應有關；體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞和胚胎干細胞的外泌體具有保護心血管的作用。

外泌體的提取方法：1、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質(zhì)進行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進入凝膠孔，只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱，首先被流動相洗脫出來；小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強地滯留，更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質(zhì)，利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細胞外泌體的一種新方法。外泌體提取：回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關），純度也受到質(zhì)疑。

外泌體與肺病預后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達均下調(diào)，進一步研究發(fā)現(xiàn)，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預后密切相關。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術臨床常規(guī)化應用的關鍵。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷。金華外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

外泌體的提取、分離方法：開發(fā)高效、快速、穩(wěn)定，并且保持外泌體結(jié)構和生物功能完整性的方法。太原正規(guī)外泌體提取試劑供應商

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉(zhuǎn)子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Millipore)濃縮至5mL,將濃縮液重新以10倍PBS稀釋后4℃超速離心100000×g(角轉(zhuǎn)子TYPE50.2)4h,收集離心管底部約1mL液體及極微量沉淀(來自2×107個細胞)以20mLPBS重懸即為胞外體,用0.22μm過濾膜除菌后凍存于-80℃?zhèn)溆谩＃ㄔ摬襟E參考文獻“腫瘤細胞來源胞外體的分離鑒定與功能檢測”）優(yōu)點是：分離得到的外泌體純度很高。缺點是：步驟繁瑣、耗時耗力、對離心時不好把握。太原正規(guī)外泌體提取試劑供應商