重組酶是一類能夠促進DNA分子之間同源或非同源序列的重組的酶。它們在分子生物學、遺傳工程和細胞生物學中扮演著重要角色。重組酶的作用機制通常涉及識別特定的DNA序列,催化DNA鏈的斷裂和重新連接,從而實現遺傳物質的重組。重組酶的主要類型和功能包括:1.限制性內切酶**(RestrictionEnzymes):這些酶可以識別特定的DNA序列并在這些序列處切割DNA鏈。它們是基因工程中常用的工具,用于DNA片段的精確切割和克隆。2.連接酶(Ligases):連接酶可以將兩個DNA片段連接在一起,形成穩定的DNA分子。在DNA克隆和修復過程中,連接酶用于封閉切割位點產生的缺口。3.整合酶(Integr...
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的高重復性和準確性主要得益于以下幾個方面:1.**基于熒光探針的檢測方案**:該試劑盒使用熒光標記的DNA探針,當探針被Benzonase核酸酶切割時,會產生熒光信號,這種變化可以用來定量分析Benzonase的殘留量。此方法成功避免了ELISA檢測方法的一些限制,例如抗體的親和性能差異、非特異性反應以及蛋白濃度差異的問題。2.**高靈敏度**:試劑盒能夠檢測到低達約0.002U(約0.003ng)的Benzonase或BeyoZonase,樣品中的Benzonase濃度約為0.0002U/μl或0.3pg/μl,這為準確檢測提供了技術保障。3.**操作簡...
熒光探針法是一種利用熒光標記的分子(即熒光探針)來檢測和定量目標分子的方法。這種方法廣泛應用于生物化學、分子生物學和醫學診斷等領域。以下是熒光探針法的一些關鍵特點和工作原理:1.**熒光標記**:熒光探針是一類特殊的分子,它們含有可以發出熒光的化學基團(熒光團)。這些熒光團在受到特定波長的光激發時,會發出特定波長的光。2.**特異性結合**:熒光探針通常設計成能夠特異性地與目標分子結合,如DNA、RNA、蛋白質或其他小分子。這種結合通常是通過分子間的互補性,如氫鍵、疏水作用或離子鍵等實現的。3.**信號變化**:熒光探針在結合目標分子前后,其熒光特性(如熒光強度、波長、壽命等)會發生改變。這種...
合成互補DNA(cDNA)的試劑盒是一種實驗室工具,用于從RNA模板通過逆轉錄過程合成DNA。逆轉錄是一種酶促反應,其中RNA模板被逆轉錄酶(一種特殊的DNA聚合酶)讀取,并根據RNA序列合成一條互補的DNA鏈。這個過程在分子生物學研究中非常重要,因為它允許科學家從RNA樣品中獲取遺傳信息,并進行進一步的分析和應用。cDNA合成試劑盒通常包含以下關鍵組分:1.**逆轉錄酶**:一種特殊的酶,能夠以RNA為模板合成DNA鏈。例如,M-MuLV反轉錄酶是一種常用的逆轉錄酶。2.**RNase抑制劑**:一種蛋白質,可以防止RNA樣品在實驗過程中被環境中的RNase酶降解。3.**緩沖液**:提供適...
PCR抑制劑是指那些在PCR反應中能夠干擾或阻礙DNA擴增的物質。這些物質通常來源于生物樣本本身或者樣本的收集和處理過程。以下是一些PCR抑制劑的特點:1.**多樣性**:PCR抑制劑可以是多種不同的化合物,包括膽酸鹽、尿素、血紅素、酚類化合物、蛋白質、多糖、植物或血液成分等。2.**來源**:它們可能來自血液(如血紅素)、尿液(如尿素)、糞便(如膽酸鹽)、植物(如多酚和多糖)、土壤(如腐殖酸)或化學物質(如酚類化合物)。3.**影響**:抑制劑可以影響DNA聚合酶的活性,干擾引物的退火,或與DNA模板發生非特異性結合,導致PCR擴增效率降低或特異性下降。4.**復雜性**:由于樣本來源的復雜...
pA-Tn5轉座酶是一種經過改造的高活性Tn5轉座酶,與ProteinA融合,形成一種新型融合酶,應用于CUT&Tag技術中,用于研究蛋白質與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點:1.**高活性**:pA-Tn5轉座酶是超高活性的突變形式,體外轉座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉座酶的N端結構域為ProteinA的一部分,可以與免疫球蛋白的Fc區相互作用,特別是與大多數哺乳動物的IgG結合。3.**Tn5轉座酶活性**:C端結構域為Tn5轉座酶,能夠特異性識別轉座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd),并在形成轉座復合體后隨機插入靶D...
5'DNA腺苷酰化試劑盒的單步反應是一種高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據試劑盒說明書,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA連接酶(或其他腺苷酰化酶)、ATP和相應的緩沖液按比例混合。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端。3.**酶失活**:-反應完成后,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷酰化酶,這一步是為了防止后續的去腺苷酰化現象,確保反應的穩定性。4.**產物收集*...
T4UvsX重組酶在生產時由大腸桿菌表達和純化,指的是利用分子生物學技術將T4UvsX重組酶的基因克隆到大腸桿菌(Escherichiacoli)中,然后通過大腸桿菌的生物合成機制來生產這種酶。具體過程如下:1.**基因克隆**:首先,科學家們會從T4噬菌體中分離出編碼T4UvsX重組酶的基因。2.**載體構建**:將這個基因插入到一個質粒(一種小型、圓形的DNA分子)中,這個質粒可以作為載體,將目標基因導入大腸桿菌。3.**轉化**:將含有T4UvsX基因的質粒轉化到大腸桿菌細胞中。轉化是指將外源DNA引入到細胞內的過程。4.**表達**:一旦質粒進入大腸桿菌細胞,它將開始表達T4UvsX基...
磁珠法質粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米分離技術和細菌細胞的SDS堿裂解法從菌體中提取高質量質粒DNA的實驗工具。以下是一些關于磁珠法質粒小量抽提試劑盒的關鍵信息:1.**操作簡便性**:-操作快速簡單,可以在60分鐘內完成96個不同樣品的提取,實現質粒提取的高通量化和自動化。2.**高純度和高產量**:-抽提得到的質粒純度高,OD260/OD280比值一般為1.8~1.9之間,OD260/OD230比值大于2.0,可以直接用于轉化、DNA測序、PCR和酶切等后續實驗。3.**試劑盒組件**:-包含BufferMP1、BufferMP2、BufferMP3、PureMagBeads、Buff...
Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒的應用確實非常廣,主要體現在以下幾個方面:1.**生物制藥**:在生物制藥行業中,確保產品中無核酸酶殘留是非常重要的,以避免潛在的免疫反應或影響藥物的穩定性和效果。2.**重組蛋白純化**:在蛋白質的純化過程中,去除樣品中的核酸酶殘留對于提高純度和防止后續反應的干擾至關重要。3.**疫苗生產**:疫苗制備過程中,去除DNA污染是滿足監管要求和保障疫苗安全性的關鍵步驟。4.**細胞培養**:在細胞培養過程中,去除培養基中的核酸酶殘留有助于防止細胞受到不必要的酶活性影響。5.**分子生物學研究**:在分子生物學實驗中,如PCR、克隆、基因表達分析等,去除樣品中...
BloodDirectPCRMasterMix(2×)是一種專為從全血樣本直接進行PCR擴增而設計的即用型2倍濃度的預混合溶液。這種產品允許研究人員在不需要預先進行DNA提取或樣品處理的情況下,直接使用抗凝血樣品或干血斑樣品進行基因組DNA中目的基因的擴增。它通常包含以下特點:1.**耐血液樣本中的抑制劑**:含有的DNA聚合酶能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉等。2.**高效率**:特別改造的DNA聚合酶具有高效率,能夠快速擴增目標DNA。3.**簡便性**:簡化了PCR實驗的步驟,因為不需要進行DNA的提取和純化。4.**直接電泳**:PCR產物可直接上樣進行電泳...
pA-Tn5轉座酶是一種經過改造的高活性Tn5轉座酶,與ProteinA融合,形成一種新型融合酶,應用于CUT&Tag技術中,用于研究蛋白質與基因組DNA的相互作用。這種融合酶具備以下特點:1.**高活性**:pA-Tn5轉座酶是超高活性的突變形式,體外轉座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉座酶的N端結構域為ProteinA的一部分,可以與免疫球蛋白的Fc區相互作用,特別是與大多數哺乳動物的IgG結合。3.**Tn5轉座酶活性**:C端結構域為Tn5轉座酶,能夠特異性識別轉座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd),并在形成轉座復合體后隨機插入靶D...
dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學試劑,通常以100mM的濃度提供。這種溶液主要用于支持DNA的合成過程,如聚合酶鏈反應(PCR)、DNA測序、填入反應、切口平移、cDNA合成和TdT加尾反應等。dATP的化學結構是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,它是DNA聚合酶在DNA復制過程中用來合成DNA鏈的原料之一。在Sanger測序中,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,后者是dATP的一種衍生物,缺少3'-OH基團,用于鏈終止反應。dATP溶液應儲存在-20°C的條件下以保持其穩定性和活性,有效期通常為兩年。在生產過程中,dATP通常按照ISO9001...
5'DNA腺苷酰化試劑盒的單步反應是一種高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據試劑盒說明書,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA連接酶(或其他腺苷酰化酶)、ATP和相應的緩沖液按比例混合。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端。3.**酶失活**:-反應完成后,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷酰化酶,這一步是為了防止后續的去腺苷酰化現象,確保反應的穩定性。4.**產物收集*...
5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶通常被稱為腺苷酰化酶(Adenylase),這種酶能夠催化5'端磷酸化的單鏈DNA或RNA(pDNA或pRNA)轉換成5'端腺苷酰化DNA或RNA(AppDNA或AppRNA)。根據搜索結果,該酶的來源是嗜熱古細菌,在大腸桿菌中進行表達并純化而獲得。這種酶在反應中將ATP分解成AMP和PPi,然后將AMP轉移到單鏈DNA的5'磷酸基團上,形成腺苷酰化單鏈DNA,從而制備出腺苷酰化接頭(linker)。此外,一些5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶是MthRNA連接酶(例如NEB#M2611A),這種酶也用于生成高產量的5'腺苷酰化DNA,并且操作簡便,具有超過9...
SgMagBeads是一種磁性納米粒子,通常用于生物樣品的提取和純化過程,包括核酸(DNA或RNA)的提取。在磁珠法質粒小量抽提試劑盒中,SgMagBeads或類似的磁珠產品作為組分之一,發揮著至關重要的作用。以下是SgMagBeads與磁珠法質粒小量抽提試劑盒之間的聯系:1.**純化介質**:-SgMagBeads作為磁珠法質粒抽提試劑盒中的一個關鍵組分,充當核酸純化介質的角色。2.**特異性吸附**:-在質粒DNA的提取過程中,SgMagBeads能夠特異性地吸附裂解后的質粒DNA,而其他雜質如蛋白質、RNA等則不被吸附。3.**快速分離**:-利用外部磁場,SgMagBeads可以迅速與...
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)是一種用于合成互補DNA(cDNA)的試劑盒,它通過逆轉錄過程從信使RNA(mRNA)或總RNA模板合成cDNA的鏈。這類試劑盒通常包含逆轉錄酶(ReverseTranscriptase,RT)和其他必要的組分,以確保高效和準確的cDNA合成。RNaseH-表示該試劑盒使用的逆轉錄酶缺乏RNaseH活性,這意味著在合成cDNA鏈的過程中不會發生RNA的降解,從而可以產生更高產量的全長cDNA,特別是從較長的模板(可達13kb)。該試劑盒通常包括以下組分:-逆轉錄酶,如RevertAidHMinusM-MuLVReverseTr...
5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶通常被稱為腺苷酰化酶(Adenylase),這種酶能夠催化5'端磷酸化的單鏈DNA或RNA(pDNA或pRNA)轉換成5'端腺苷酰化DNA或RNA(AppDNA或AppRNA)。根據搜索結果,該酶的來源是嗜熱古細菌,在大腸桿菌中進行表達并純化而獲得。這種酶在反應中將ATP分解成AMP和PPi,然后將AMP轉移到單鏈DNA的5'磷酸基團上,形成腺苷酰化單鏈DNA,從而制備出腺苷酰化接頭(linker)。此外,一些5'DNA腺苷酰化試劑盒中使用的酶是MthRNA連接酶(例如NEB#M2611A),這種酶也用于生成高產量的5'腺苷酰化DNA,并且操作簡便,具有超過9...
5'DNA腺苷酰化試劑盒的適用性非常廣,主要包括以下幾個方面:1.**miRNA克隆**:該試劑盒可用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆時,3'端添加接頭的制備。2.**高通量測序建庫**:在高通量測序中,該試劑盒可用于制備5'端腺苷酰化修飾的單鏈DNA,這些DNA可以用于測序文庫的構建。3.**PCR檢測**:在PCR檢測中,該試劑盒可以幫助制備具有特定5'端修飾的DNA片段,以適應某些PCR應用的需求。4.**單鏈DNA或RNA的5'端腺苷酰化**:試劑盒可以催化5'端磷酸化的單鏈DNA或單鏈RNA轉換成5'端腺苷酰化DNA或RNA,無論3'端是否進行了氨基化等封閉。5....
5'DNA腺苷酰化試劑盒是一種用于將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷酰化修飾的實驗工具,其主要應用于miRNA等3'端為羥基的RNA或單鏈DNA在克隆、高通量測序建庫或PCR檢測等時,在3'端添加的接頭的制備。以下是5'DNA腺苷酰化試劑盒的一些關鍵特點和使用方法:1.**高效轉化**:該試劑盒能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉化成腺苷酰化DNA(AppDNA),從而提高產量并避免膠回收提純步驟。2.**操作簡便**:單步反應即可完成腺苷酰化,無需復雜的操作或額外的純化步驟。3.**高溫反應**:在65℃的高溫下進行反應,這有助于避免DNA或RNA的二級結構對腺苷酰化反應的干...
脫氧腺苷三磷酸(Deoxyadenosinetriphosphate,dATP)是一種去氧核苷酸三磷酸,它是DNA合成和復制過程中必需的原料之一。dATP的結構與腺苷三磷酸(ATP)相似,但dATP的五碳糖2號碳上缺少一個-OH基,取而代之的是一個氫原子。dATP是四種dNTPs(脫氧核糖核苷酸三磷酸)之一,四種dNTPs包括dATP、dCTP、dGTP和dTTP,它們分別對應DNA中的腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤和胸腺嘧啶。dATP的化學式為C10H16N5O12P3,分子量為491.182,CAS登錄號為1927-31-7。在實驗室中,dATP通常以100mM的濃度提供,用于各種分子生物學技術,...
磁珠法質粒小量抽提試劑盒中的磁珠分離通常涉及以下步驟:1.**裂解細胞**:-首先,使用裂解液(含有SDS等成分)裂解細菌細胞,釋放出質粒DNA。2.**結合磁珠**:-將磁珠加入到裂解后的混合物中,磁珠表面通常修飾有能夠特異性結合核酸的配體,使得質粒DNA吸附于磁珠表面。3.**磁分離**:-將含有磁珠和質粒DNA的混合物置于磁分離架上。磁分離架產生磁場,使得磁珠迅速聚集在管壁或管底。4.**未結合物質**:-在磁珠固定后,小心移除上清液,避免擾動磁珠。上清液中含有未吸附的蛋白質、RNA和其他細胞碎片。5.**洗滌磁珠**:-向磁珠中加入洗滌液,輕輕混勻以去除殘留的雜質,然后再次使用磁分離架...
PCR產物直接進行電泳分析通常涉及以下步驟:PCR擴增:首先使用PCR Master Mix和特定的引物對目標DNA片段進行擴增。PCR產物的準備:如果使用的是含有預混凝膠加載染料的PCR Master Mix(如某些Blood Direct PCR Master Mix),則PCR產物在擴增后已經含有了適合電泳的染料。如果沒有使用含染料的Master Mix,則需要在PCR反應完成后向產物中添加適量的凝膠加載染料。電泳槽的準備:清潔電泳槽,確保沒有灰塵或殘留物。安裝電泳板和梳子,注意密封以防緩沖液泄漏。灌注緩沖液:向電泳槽中灌注適量的電泳緩沖液,常用的緩沖液有1X TAE或1X TBE。PC...
BloodDirectPCRMasterMix(2×)適合血液樣本的PCR擴增主要通過以下幾個方面:1.**抗血液抑制劑能力**:該預混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如膽酸鹽、血紅素、蛋白質等。2.**優化的緩沖體系**:預混合溶液中的緩沖體系經過特別優化,以適應血液樣本中的特定條件,包括pH、離子強度和Mg2+濃度,從而提高PCR擴增的效率和特異性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,能夠在復制DNA時減少錯誤,保證擴增結果的準確性。4.**快速擴增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix產品具有快速擴增的...
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的緩沖溶液是專門為逆轉錄反應設計的,以確保酶的活性和反應的高效進行。根據搜索結果,這些緩沖液通常包含以下特點:1.**優化的pH值**:緩沖液具有特定的pH值,以保證逆轉錄酶在合適pH條件下工作。2.**包含dNTPs**:一些緩沖液已經預混合了dNTPs(去氧核苷酸三磷酸),這是cDNA合成的必需原料。3.**穩定性**:緩沖液配方設計為在一定溫度范圍內穩定,以適應不同溫度下的逆轉錄反應。4.**可能包含RNase抑制劑**:某些緩沖液中包含RNase抑制劑,以防止RNA模板在實驗過程中被降解。5.**適用于不同溫度**:...
dNTPMix(脫氧核苷酸三磷酸混合溶液)的穩定性是進行PCR和其他DNA合成實驗時的重要因素。以下是一些關于dNTPMix穩定性的關鍵點:1.**儲存條件**:dNTPMix應儲存在-20°C的條件下,以保持其穩定性和活性。2.**避免反復凍融**:dNTPMix應避免多次凍融,因為這可能會影響其穩定性。3.**使用頻率**:如果使用頻率較高,使用后應以-20°C儲存。4.**長期儲存**:對于長期儲存或使用頻率較低的情況,建議將dNTPMix儲存在-70°C以保持好的狀態。5.**質量控制**:dNTPMix應不含DNase和RNase,以避免DNA或RNA的降解。6.**純度**:dNT...
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的緩沖溶液是專門為逆轉錄反應設計的,以確保酶的活性和反應的高效進行。根據搜索結果,這些緩沖液通常包含以下特點:1.**優化的pH值**:緩沖液具有特定的pH值,以保證逆轉錄酶在合適pH條件下工作。2.**包含dNTPs**:一些緩沖液已經預混合了dNTPs(去氧核苷酸三磷酸),這是cDNA合成的必需原料。3.**穩定性**:緩沖液配方設計為在一定溫度范圍內穩定,以適應不同溫度下的逆轉錄反應。4.**可能包含RNase抑制劑**:某些緩沖液中包含RNase抑制劑,以防止RNA模板在實驗過程中被降解。5.**適用于不同溫度**:...
磁珠法DNA凝膠回收試劑盒是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中快速、高效地回收DNA片段的實驗工具。它通常包含特異性吸附核酸分子的納米磁珠和相應的緩沖液系統,能夠去除雜質,得到高質量的DNA回收產物。這種試劑盒適用于從TAE和TBE瓊脂糖凝膠中回收大小在100bp到30kb之間的DNA片段,回收效率通常可達70%左右。使用磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的主要優勢包括:1.操作簡便快速,整個回收過程大約只需30分鐘。2.無需離心,方便實現高通量和自動化的DNA回收。3.與柱式法相比,磁珠法對于長片段DNA的回收效率更高,可高出約20%。4.純化得到的DNA可以直接用于酶切、連接、測序等后續分子生物學實驗。...
EB分子生物學通常指的是溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)在分子生物學中的應用。溴化乙錠是一種常用的熒光染料,主要用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA或RNA。它通過插入核酸的堿基對之間,在紫外光照射下發出橙紅色的熒光,從而實現對核酸的可視化。溴化乙錠與DNA的結合幾乎沒有堿基序列特異性,并且在高離子強度的飽和溶液中,大約每2.5個堿基插入一個EB分子。然而,值得注意的是,溴化乙錠具有一定的毒性,它是一種強誘變劑,具有高致病性。在實驗結束后,需要對含EB的溶液進行凈化處理,以避免對環境和人體健康造成危害。處理方法包括稀釋EB溶液至低于0.5mg/ml的濃度,然后加入化學物質進...
5'DNA腺苷酰化試劑盒的單步反應是一種高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據試劑盒說明書,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA連接酶(或其他腺苷酰化酶)、ATP和相應的緩沖液按比例混合。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端。3.**酶失活**:-反應完成后,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷酰化酶,這一步是為了防止后續的去腺苷酰化現象,確保反應的穩定性。4.**產物收集*...