膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。膠原蛋白就像骨骼中的一張充滿小洞的網(wǎng),它會牢牢地留住就要流失的鈣質(zhì)。太原鼠尾膠原產(chǎn)品介紹鼠尾膠原在心肌細胞氧化損...
簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,純度達到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結(jié)果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞,貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL,pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細胞在三維凝膠內(nèi)生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長...
鼠尾膠原包被培養(yǎng)板:胎干細胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細胞,進而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細胞來源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細胞向血管內(nèi)皮細胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細胞H1,將H1細胞團塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細胞生長添加劑的EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細胞逐步表達內(nèi)皮細胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化細胞表達內(nèi)皮細胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31...
除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當(dāng)然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型,對于轉(zhuǎn)基因小鼠而言,如果無法通過毛色來分辨動物的基因型,往往會選用經(jīng)典的PCR法。通過蛋白酶K裂解,「剪尾、加堿、加熱」三連的方法都能制備一管(香噴噴)的「...
鼠尾膠原:1實驗制備:實驗設(shè)備及材料:大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實驗內(nèi)容:1、制備鼠尾膠原(兩個同學(xué)一組操作)。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。實驗步驟:制備鼠尾膠原:1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘;2、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱;3、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡;4、重復(fù)步驟2、3,直至尾腱量夠用;5、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克)。可直接或間接參與細胞的附著。金華鼠尾膠原哪家好膠原蛋白的提取方法...
鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法。各個材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,采用冷凍干燥工藝制備。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收、容易引起機體過敏、止血效果差等缺點,本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,生物相容性好;止血效果快,具有很強的親水性;同時可啟動血小板的凝聚,一旦血小板凝聚,就可形成血栓,進而促使血漿結(jié)塊阻止血流。同時,膠原表面的特定區(qū)域可以與細胞表面存在的類似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,可以起到防止腸粘連的功效。鼠尾膠原醋酸溶解:將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中。貴陽鼠尾膠原廠家供應(yīng)鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓?..
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))...
鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優(yōu)點:1、本發(fā)明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產(chǎn)效率,同時避開了使用其他設(shè)備帶來的成本上升問題。2、本發(fā)明專利生產(chǎn)的止血材料(止血海綿),其動物實驗表明其具有非常好的止血效果。也可應(yīng)用于內(nèi)臟出血。具有廣闊的應(yīng)用前景。3、本發(fā)明制備的止血材料具有可完全被人體吸收,與出血創(chuàng)面一接觸,其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血創(chuàng)面上,外面則形成連續(xù)的壓迫干層。啟動凝血因子。同時,聚乙烯醇為成膜材料,兩種的協(xié)同效應(yīng)形成了一種理想的止血狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。細胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例。昆明正規(guī)鼠尾膠原銷售廠家鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取,但這類膠原蛋白不光有油脂等其他雜質(zhì),也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型;同時,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒傳染,如果用此開發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質(zhì)的不穩(wěn)定及潛在的風(fēng)險及危害;再次,人的真皮中主要含有I型和III型,但III型不易大量獲得,故應(yīng)用單一的I型膠原蛋白是解決體外應(yīng)用的醫(yī)用產(chǎn)品引起的抗原性問題的關(guān)鍵,這也是I型膠原蛋白抗原性低的原因之一。同時,I型膠原蛋白的三重螺旋的氨基酸結(jié)構(gòu)決定了它的一些特有的性能,如機械性能、促進細胞生長...
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿。金華正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商鼠尾膠原蛋白...
鼠尾膠原膠凝程序:膠原蛋白I按以下步驟使其pH達到堿性時凝膠。1)將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和,把蓋子放在150mm的培養(yǎng)皿上,暫放置一邊。2)將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上,厚度可以根據(jù)需要改變,膠原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的蓋玻片。對于直徑100mm的培養(yǎng)皿,每個加入約6mL;對于60mm培養(yǎng)皿添加約2.3mL,對于35mm培養(yǎng)皿添加約1mL。3)將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。4)在無菌蒸餾水中(35mm培養(yǎng)皿加5mL,60mm培養(yǎng)皿加10mL等)浸泡涂布的蓋玻片或...
利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構(gòu)成膠原纖維。然后,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6d,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化;礦化6d后,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨...
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,倒入0.5mL自組裝液,室溫放置20min。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,滴入聚丙烯(PAA)至...
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細胞,以3...
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:將尾巴從動物身體切除后,會冷凍起來,并提取尾巴里的筋腱。然后,將筋腱切成小塊,并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法,能將膠原蛋白從動物材料中分離出來。在食品加工領(lǐng)域,鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當(dāng)作酸奶,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺和質(zhì)地。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,據(jù)說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進關(guān)節(jié)健康。當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原。長沙鼠尾膠原廠家鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說...
蘇州君欣生物科技有限公司鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環(huán)境,使細胞在三維環(huán)境中生長。不開玩笑的說,本身高純度的鼠尾膠原蛋白是能吃的。但是,實驗室里制備出來的各種材料和原材料都不應(yīng)該被食用,實驗室也是禁食的。這是傳說中的制作方法:面對大家都感興趣的知識,智圈始終抱著嚴(yán)謹(jǐn)且專業(yè)的態(tài)度,決心找出科學(xué)的制作方法。鼠尾膠原醋酸溶解:稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。太原正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細...
除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當(dāng)然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型,對于轉(zhuǎn)基因小鼠而言,如果無法通過毛色來分辨動物的基因型,往往會選用經(jīng)典的PCR法。通過蛋白酶K裂解,「剪尾、加堿、加熱」三連的方法都能制備一管(香噴噴)的「...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Wes...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取,但這類膠原蛋白不光有油脂等其他雜質(zhì),也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型;同時,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒傳染,如果用此開發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質(zhì)的不穩(wěn)定及潛在的風(fēng)險及危害;再次,人的真皮中主要含有I型和III型,但III型不易大量獲得,故應(yīng)用單一的I型膠原蛋白是解決體外應(yīng)用的醫(yī)用產(chǎn)品引起的抗原性問題的關(guān)鍵,這也是I型膠原蛋白抗原性低的原因之一。同時,I型膠原蛋白的三重螺旋的氨基酸結(jié)構(gòu)決定了它的一些特有的性能,如機械性能、促進細胞生長...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Wes...
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。制備鼠尾膠原方法:1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘;2、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱;3、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡;4、重復(fù)步驟2、3,直至尾腱量夠用;5、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克);6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中;7、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液;8、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期;9、離心,4000轉(zhuǎn)/分,10-15分鐘;10...
利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構(gòu)成膠原纖維。然后,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6d,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化;礦化6d后,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨...
鼠尾膠原,10mg包裝,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml,容量瓶配制比較準(zhǔn)確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z準(zhǔn)確),加入盛膠原的瓶中,輕輕顛倒,不要震蕩,蛋白容易起泡。幾分鐘即可,蛋白質(zhì)非常好溶解。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大點的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一檔就行,避免加入氣泡。然后4度過夜除菌。4.第二天將上層膠原溶液分裝進EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷凍。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。無錫正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白...
鼠尾膠原蛋白I型,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜。5.從包被表面除去多余的液體。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接...
鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1.主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司);多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,用75%的乙醇浸泡5min。將尾巴剪開,去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,將肌鍵置于平皿中剪碎,按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,將肌鍵分散于醋酸溶液中,4℃放置一周,然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成膠凍狀凝膠,置于冰箱4℃保存。論鼠尾膠原能...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,West...
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時,然后真空冷凍干燥,凍干產(chǎn)品經(jīng)進一步處理得到含水率在3%以...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié))...