通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數;變異系數(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優點。魚精子分析DAP
CASA可將每個精子的活力按以下分級:(1)前向運動型(PR):精子運動活躍、線性運動或者在較大的范圍內運動。(2)非前向運動型(NP):所有其他非前向運動的形式,如精子在較小的范圍內運動,精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動。(3)完全不動型(IM):精子完全不動。CASA系統檢測的這些參數有一套標準的術語。(1)VCL=曲線速度(mm/s)。精子頭沿其實際的曲線,即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度。檢測細胞活力。(2)VSL=直線速度(mm/s)。根據精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運動的時間平均速度。(3)VAP=平均路徑速度(mm/s)。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度。(4)ALH=精子頭側擺幅度(mm)。精子頭沿其空間平均軌跡側擺的幅度。以側擺的最大值或平均數值表示。(5)LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。(6)WOB=擺動性。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性。空間平均路徑的直線性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打頻率(Hz)。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率。(9)MAD=平均移動角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉折角度的時間平均***值。南京計數精子分析VAP男性精液檢測主要依賴計算機輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses,CASA)。
精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同,操作人員上崗前必須經過嚴格培訓,了解工作原理、操作規程、校正方法等,使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經歷如下操作步驟[1]:開機接通電源,打開計算機輔助**分析系統。1.輸入患者信息及**理學檢查結果。2.加樣取液化的**1滴,滴入精子計數板的計數池中,置顯微鏡操作平臺上,點擊“活動顯示”菜單,調節好顯微鏡焦距,顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單,系統進入自動分析狀態,圖像顯示區出現精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結束后,可根據需要打印出分析結果。
精子動力分析儀在各物種精子檢測方面具有明顯重要作用。它具有高度的客觀性,該儀器通過相差的圖像分析技術和算法,對精子的運動參數進行精確測定,避免了人工觀察和評估時可能出現的主觀偏差,結果更加準確可靠。其次,檢測參數豐富。它不僅能提供精子活力、濃度等基本信息,還能詳細分析精子的運動軌跡、速度變化、擺動頻率等多種參數,從多個維度評估精子質量,為實驗提供更完善的依據。儀器可處理大量精子樣本,在短時間內生成詳細的檢測報告,提高了檢測效率。其操作相對簡便,操作人員可以盡快掌握操作方式,經過一定培訓后即可熟練操作,有利于在不同領域里廣泛應用。精子分析儀因其高效、J準的特點,已經在眾多醫療機構中廣泛應用,深受患者信賴。
采集精液前5~7天內必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈。可采用**法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來自精囊,故應收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開頭部分。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應干凈、無菌、干燥,采精前容器的溫度應與室溫相同;瓶子不應過大,但瓶口不應過小,以免將精液射出瓶外;還應貼上標簽,記錄姓名及取精時間。在冷天應將精液標本保溫,放置在貼身內衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時內送到實驗室。Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優點。上海瀕危物種精子分析W.H.O 5
通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算,從而得出精子動靜態各項參數。魚精子分析DAP
精子計數是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數量將精子計數值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細胞計數板上,在顯微鏡下計數紅細胞計數區內的所有精子數并換算為每m1內所含精子數。此外還可用電子細胞計數儀經調整閾值設置后計數精子數量。將已經液化的精液標本均勻混合,用白細胞計數吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計數板內,計數二大格(每格面積1平方毫米)之精子數,在尾數后加5個“0”即得每毫升精液內精子數。例如計數為1280個,則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時,可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內,稀釋后進行計數。如精子的數目極少,亦可改為稀釋10倍計數。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計數來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計數來反映睪丸的生精機能。魚精子分析DAP