血清是否需要做滅活處理?這取決于您的應用。滅活過程中,會導致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。比較常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,因為補體在機體中參與細胞殺傷,巨噬細胞和淋巴細胞活化,肥大細胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過程,所以一般在免疫學相關研究中及肌細胞和干細胞的培養過程中需要對血清進行滅活處理。在對細胞和活疫苗進行支原體檢驗中,《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗用液體培養基的組成成分。廣西雞血清廠家直銷
牛血清是細胞培養中用量的天然培養基,含有豐富的細胞生長必需的營養成分,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數生長的,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到祛毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。血清,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用:1.血清提供:營養和能量來源;生長和粘附因子;肽和類固醇;載體蛋白。2.保護細胞:免受蛋白酶、毒性物質、PH值波動、機械剪切力、氧化及自由基的損傷。陜西羊血清有些時候,根據實驗需求,還要對血清進行一些特殊的加工。
1989年左右,也有國外學者建議用豬血清取代牛血清,用于培養制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應。其他動物源血清兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結合用作免疫細胞化學[1]和免疫組織化學中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發現,質量的山羊血清可用于某些細胞的培養。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定
去脂胎牛血清(貨號:C3840-0050/0100/0500/0050X10)去脂胎牛血清通過固體基質脫脂作用去除內源性脂類、甘油三酯和膽固醇,含量只為標準胎牛血清的1/3。去脂胎牛血清在細胞培養中用量較多,其含有豐富的細胞生長必須的營養成分,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的,基礎培養基中沒有或量很少的營養物以及主要的低分子營養物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱源質結合,起到作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基上所需因子來源。起酸堿緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。去脂胎牛血清可用于蛋白激酶CK2-α’與腺樣囊性肺轉移相關性研究:可以使血清分離快,分離血清多不易受外界溫度的影響。
?血清應如何保存?未拆封的血清應存放于-15至-20℃,避免反復凍融。拆封后的血清應無菌分裝成一次的用量并存放于-15至-20℃,2~8℃溶解后建議盡快使用。?血清的有效期是多久?大部分血清效期是5年,針對每個批次,請通過質檢文件確定具體效期日期。?血清應如何融解?取出的血清置于2~8℃融化,不時旋轉混勻,充分融解后分裝或使用。?為什么有時血清中出現絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?多種原因可能導致絮狀沉淀的形成,比較常見的原因之一是融化過程中,脂蛋白聚集所致。該現象一般不會影響產品質量。可以400g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據需要選擇合適的濾膜孔徑,一般比較常用的是0.22umPES材質的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養基內一起過濾而不是直接過濾血清。在一些情況下,中和毒性物質維護細胞不受損害。深圳馬血清
夏天在常溫下即可,冬天要在20-30℃下靜置30-45分鐘。廣西雞血清廠家直銷
放射免疫法以不同稀釋度的抗血清與質量標記抗原混合,孵育24h后,測定其結合率。通常以結合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結合率為50%時的稀釋度為1:15000,則該血清的效價就是1:15000。抗血清的效價,除由抗血清本身的性質決定外,還受標記抗原的質量、孵育時間,所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響,在工作中必須引起注意。(2)雙向擴散法利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴散,兩者在相交處產生沉淀線,以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。球脂板的制備:100mlpH7.1的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內,于水浴中加溫攪拌,使瓊脂完全溶解,趁熱用紗布過濾,待溶液冷卻到65°C左右時,加入疊氮鈉(NaN3),使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在干凈平皿或玻片上,約3mm厚,待其冷卻,完全凝固后,用打孔器打孔。中間孔內加適量抗原(容量為50ul)周圍各孔內分別加入50ul1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清,37°下孵育24h,觀察有無沉淀線產生,以判斷血清的稀釋度。廣西雞血清廠家直銷
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