去脂胎牛血清(貨號：C3840-0050/0100/0500/0050X10)去脂胎牛血清通過固體基質(zhì)脫脂作用去除內(nèi)源性脂類、甘油三酯和膽固醇，含量只為標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的1/3。去脂胎牛血清在細胞培養(yǎng)中用量較多，其含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成分，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數(shù)生長的，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱源質(zhì)結(jié)合，起到作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基上所需因子來源。起酸堿緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。去脂胎牛血清可用于蛋白激酶CK2-α’與腺樣囊性肺轉(zhuǎn)移相關(guān)性研究：細胞培養(yǎng)時，要保證細胞可以順利生長和增殖，需添加10%～20%的血清，動物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。云南雞血清廠家

抗血清的采集與保存家兔是很常用以產(chǎn)生抗體的動物，因此這里主要討論兔血的收集。羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血，鼠等小動物取血可參閱有關(guān)資料。取兔血有兩種方法，一是耳緣靜脈或耳動脈放血，一是頸動脈入血，也可心臟采集血。取動脈或靜脈放血時，將免放入一個特造的木匣或籠內(nèi)，耳露于箱(籠) 外，也可由另一人捉住兔身。剪去耳緣的毛，用少許二甲苯涂抹耳廓，30s后，耳血管擴張、充血。用手輕拉耳尖，以單面剃須刀或尖的手術(shù)刀片,快速切開動脈或靜脈，血液即流出，每次可收集30~40ml。然后用棉球壓迫止血，凝血后洗去二甲苯。二星期后，可在另一耳放血。此法可反復(fù)多次放血。頸動脈放血時，將免仰臥，固定于兔臺，剪去頸部的毛，切開皮膚，暴露頸動脈，插管，放血。放血過程中要嚴格按無菌要求進行。收集的血液置于室溫下1h左右，凝固后，置4°C下，過夜 (切勿冰凍) 析出血清，離心，4000rpm，10min。在無菌條件，吸出血清，分裝 (0.05~0.2ml) ，貯于-40°C以下冰箱，或凍干后貯存于4。C冰箱保存。南京牛血清批發(fā)此沉淀可能包括磷酸鈣結(jié)晶，但不改變血清的性能，同樣血清熱滅活也會導(dǎo)致沉淀的形成。

配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi)，用超聲波使之混勻，高壓滅菌，置4°C下保存?zhèn)溆谩Ｃ庖咔叭〉热莘e完全或不完全佐劑與免疫原溶液混合，用振蕩器混勻成乳狀，也可以在免疫前取需要量佐劑置乳缽中研磨，均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再繼續(xù)研磨成乳劑，潤十水水上10min內(nèi)完全不擴散為止。為避免損失抗原，亦可用一注射器裝抗原液，另一注射器裝佐劑，二者以聚乙烯塑料管連接，然后二者來回反復(fù)抽吸，約數(shù)十分鐘后即能完全乳化。檢查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原劑量，頭次劑量為300~500ug，加強免疫的劑量約為頭次劑量為1/4左右。每2~3周加強免疫一次。加強免疫時用不完全佐劑，頭次免疫時皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加強免疫時不必注射百日咳疫苗。在第2次加強免疫后2周，從耳緣靜脈取2~3ml血，制備血清，檢測抗體效價。如未達到預(yù)期效價，需再進行加強免疫，直到滿意時為止。當(dāng)抗體效價達到預(yù)期水平時，即可放血制備抗血清。

放射免疫法以不同稀釋度的抗血清與質(zhì)量標(biāo)記抗原混合，孵育24h后，測定其結(jié)合率。通常以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結(jié)合率為50%時的稀釋度為1:15000,則該血清的效價就是1:15000。抗血清的效價，除由抗血清本身的性質(zhì)決定外，還受標(biāo)記抗原的質(zhì)量、孵育時間，所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響，在工作中必須引起注意。(2)雙向擴散法利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴散，兩者在相交處產(chǎn)生沉淀線，以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。球脂板的制備:100mlpH7.1的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi)，于水浴中加溫攪拌，使瓊脂完全溶解，趁熱用紗布過濾，待溶液冷卻到65°C左右時，加入疊氮鈉(NaN3)，使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在干凈平皿或玻片上，約3mm厚，待其冷卻，完全凝固后，用打孔器打孔。中間孔內(nèi)加適量抗原(容量為50ul)周圍各孔內(nèi)分別加入50ul1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清，37°下孵育24h，觀察有無沉淀線產(chǎn)生，以判斷血清的稀釋度。在一些情況下，中和毒性物質(zhì)維護細胞不受損害。

按物種分類馬血清10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。豬血清豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色，可用于淋巴細胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)（生產(chǎn)支原體）, 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒（AAV）, 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。兔血清正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)方面，各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。包括售前的標(biāo)本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析--云海生物。天津豬血清廠家直銷

有些時候，根據(jù)實驗需求，還要對血清進行一些特殊的加工。云南雞血清廠家

用于免疫的動物作免疫用的動物有哺乳類和禽類，主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等，實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量，如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因動物反應(yīng)良好，而且能夠提供足夠數(shù)量的血清，用于免疫的動物應(yīng)適齡，健壯，無感染性疾患，比較好為///雄性，此外還需十分注意動物的飼養(yǎng)，以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔，最好用純種新西蘭兔，一組三只，兔的體重以2~3kg為宜。二、免疫途徑免疫途徑有多種多樣，如靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)內(nèi)注射等，一般常用皮下或背部多點皮內(nèi)注射，每點注射0.1ml左右。途徑的選擇決定于抗原的生物學(xué)特性和理化特性，如、酶、等生物學(xué)活性抗原，一般不宜采用靜脈注射。云南雞血清廠家

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