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湖北病理免疫組化價格

來源: 發布時間:2025-03-25

醫療和預后有關的免疫組化。與醫療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫療與預后,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價,表達指數越高,表明其增殖指數越活躍,惡性度增高,預后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發現Ki-67、EGFR陽性者,淋巴結轉移率高,并與ji素受體的表達呈負相關。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應用更為范圍廣的的是子宮內膜cancer及乳腺cancer,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,有助于決定臨床醫療中是否需要加入內分泌ji素阻斷醫療,并能判斷預后,ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫療反應良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化相關知識匯總。湖北病理免疫組化價格

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免疫組化結果要如何分析?

 (1)陽性著色細胞計數法。在40*光鏡下,隨機選擇不重疊的10個視野,機器或人工計數陽性著色細胞,每組3~6張不同動物組織切片,然后進行組間比較即可。

(2)灰密度分析法??梢酝ㄟ^在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區域、相同條件下用image j進行灰密度分析,然后進行統計分析即可。

(3)評分法。用光學顯微鏡下對組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色)、陽性范圍進行評分(1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),**終可以分數相加,再進行比較。對于以上這幾種方法,各有利弊,請細心選擇。要想得到正確結果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質量切片。


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做免疫組化時如何選擇一抗?

1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結合,就像導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易出現非特異性染色(可以通過封閉等避免)。

2、應用范圍的選擇。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至標明石蠟切片或冰凍切片。

3、種屬反應性的選擇(speciesreactivity)。這一點很重要,表明這種抗體可能存在種屬差別,且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內的抗原。

4、種屬來源,一般兔來源的多是多克隆抗體;而小鼠來源的多是單克隆抗體,但也有另外。根據此來源來選擇相應的二抗。

5、生產廠家的選擇。


免疫組化結果中的假陰性是指所有抗體標記的切片均呈陰性,無陽性信號,假陰性結果不是真實的反應。導致假陰性結果的原因有:(1)抗原修復方法選擇不當,根據不同的抗原特點采用不同的修復方法,大多數抗體要求熱修復,熱修復又包括高壓修復、微波修復及煮沸熱修復;而對某些細胞內抗原和細胞間質抗原需要用酶消化,如表皮生長因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化,而Vimentin則不用修復;(2)一抗本身的問題:一抗效價降低或失效。在免疫組化中染色結果的假陰性會導致錯診或漏診,進而影響臨床診斷及延誤醫療。解決這一問題的可通過設立陽性對照,比較兩者染色結果。若陽性對照有表達,表明試劑和染色體系及實驗步驟均無問題;若陽性對照無表達,則檢測過程中某一試劑或某個步驟存在問題,應逐一查找原因。動物、細胞的免疫組化、免疫熒光,就找英瀚斯生物!

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免疫組化的應用領域

免疫組化在生物醫學研究和臨床診斷中有著廣泛的應用。在**學中,免疫組化通常被用于**標志物的檢測,幫助確定**的類型、分級和預后。例如,免疫組化通過檢測ER、PR和HER2的表達,可以指導乳腺*的治療方案。在神經科學中,免疫組化用于研究神經元的分布和功能。在免疫學中,免疫組化可以用于檢測炎癥細胞和免疫細胞在組織中的分布和水平。此外,免疫組化實驗技術還被廣泛應用于發育生物學、病理學和藥物研發等領域。 如何做好免疫組化實驗?安徽什么是免疫組化多少錢

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免疫組化的DAB顯色時間如何把握?

1、DAB顯色時間不是固定的,主要由顯微鏡下控制顯色時間,到出現淺棕色本底時即可沖洗;

2、DAB顯色時間很短(如幾秒或幾十秒)就出現很深的棕褐色,這很可能說明你的抗體濃度過高或抗體孵育時間過長,需要下調抗體濃度或縮短你的抗體孵育時間;

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3、此外,若很短時間就出現背景很深,還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全,需要延長封閉時間;

4、DAB顯色時間很長(如超過十幾分鐘)才出現陽性染色,一方面可能說明你的抗體濃度過低或孵育時間過短(比較好一抗4度過夜);另一方面就是封閉時間過長。 湖北病理免疫組化價格

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