在生物工藝中，核酸酶的主要作用是高效消化宿主細胞DNA（HCD），并將其分解成足夠小的片段，以便在下游純化過程中去除。雖然大多數核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段，比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈，但實際生產中的核酸污染情況更加復雜。HCD通常以染色質形式存在，與細胞裂解碎片、病毒顆粒等結合在一起，影響核酸酶的識別及剪切。因此，HCD去除的關鍵在于——核酸酶如何在復雜的生產體系中識別并剪切HCD。SAN HQ高鹽核酸酶是一種新型的、耐高鹽的工程化內切酶；海南SAN HQ高鹽核酸酶70921

一般來說，生物生產工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊商標）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環狀）的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過E.coli發酵生產得到。該酶的適宜反應條件是低鹽濃度范圍（<100mM鹽濃度），且酶活隨著鹽濃度上升而下降，在300mM鹽濃度時酶活幾乎喪失。對于細胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV，LV由于含有脂包膜結構一般都在生理鹽條件下存在，而AAV在高鹽條件下不易團聚、更穩定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下，Benzonase活性受到抑制。北京上海倍篤生物高鹽核酸酶70921-202ArcticZymes所有產品的開發、生產及銷售等都符合ISO13485:2016質量管理體系標準。

氯化銫(CsCl)/碘克沙醇密度梯度離心大概是經典的AAV純化技術了。這種技術適用于所有血清型且分辨率高，但是因生產工藝很難放大，低通量等缺點阻礙了其在工業中的應用。繼密度梯度離心之后，色譜法不斷發展，并逐漸成為一種成熟的、主流的方法。色譜法通過載體的凈電荷、疏水性、對配體的親和性、大小以及其他性質來分離并純化載體。這類技術有諸多的優點：更具可擴展性和成本效益，可多次重復使用，可并行運行或串聯運行，還可有效去除非定植劑，這是開發后期的一個關鍵方面。

ArcticZymes廠家對鹽活性核酸酶系列產品（Salt Active Nucleases，SANs）的生產及質控，在符合ISO13485:2016體系基礎上，增加了cGMP質控標準，如microbes、endotoxin、蛋白酶等，符合USP-EP要求。廠家提供HQ級別和GMP級別的SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，從成本角度分別滿足臨床前和早期臨床階段、商業化大規模生產階段的需求；且GMP級SAN HQ高鹽核酸酶已完成在FDA的藥物主文件（Drug Master File, DMF）申報備案，助力加快藥物申報流程。鑒于生物制品藥物更嚴格的質量要求，廠家對SAN HQ高鹽核酸酶的生產及質控符合更高標準。

宿主細胞DNA（HCD）殘留以染色質形式存在，其中有帶負電荷的DNA、帶正電荷及疏水區段的組蛋白，就像膠帶一樣能夠吸附很多物質，包括各種雜蛋白、色譜填料、目的病毒顆粒。非特異吸附雜蛋白，會影響蛋白雜質（如HCP）等的去除；吸附到色譜填料上，會降低色譜分離純化效率；吸附到目的病毒顆粒時，會影響目的產物的穩定性，從而降低目的產物的得率。因此，從生產工藝層面來講，一定要去除HCD，從而能夠簡化工藝、提高目的產物的產量。SAN HQ終產品經過0.22 μm過濾除菌；上海高鹽核酸酶70921-202

一個美國客戶對SAN HQ高鹽核酸酶純化病毒載體的效率進行了評估。海南SAN HQ高鹽核酸酶70921

從國內來看，由于 AAV 基因藥物研發管線絕大部分集中在眼科遺傳病上，載體用量較小，三質粒共轉染 AAV 系統足以滿足未來的臨床及商業需求，因此，國內的 AAV 生產系統主要以三質粒為主。然而，考慮到未來 AAV 基因藥物在血液、神經系統、肌肉系統等領域的臨床應用，三質粒系統顯然難以勝任。如藥明生基從國外收購了 OXGENE 的輔助腺病毒 AAV 生產系統 TESSA，據報道較三質粒系統有10倍的提升；而基因藥物 CDMO 企業北京五加和基因則在國內率先采用了陳海峰博士的威洛克公司授權的Bac-to-AAV 系統，憑借公司在病毒載體領域持續30年的研發經驗，不斷摸索、試驗，終于在臨床級生產方面獲得了巨大的成功，為 AAV 基因藥物管線研發公司錦籃基因進行多批次臨床 CDMO 代工生產。海南SAN HQ高鹽核酸酶70921